C型インフルエンザウイルスCM2蛋白の翻訳後修飾部位の決定

丙型流感病毒CM2蛋白翻译后修饰位点的测定

• 批准号: 09770198
• 负责人: 村木 靖
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770198/
• 关键词: C型インフルエンザウイルス; CM2蛋白; イオンチャネル; 翻訳後修飾; オリゴマー形成

CM2は、C型インフルエンザウイルスの第6RNA分節(M遺伝子)に由来する第2の産物として、我々が同定したイオンチャネル候補蛋白である。CM2は、その細胞内輸送過程で次の4つの修飾を受ける。(1)糖鎖の付加、(2)分子間S-S結合を介するオリゴマー(2量体/4量体)の形成、(3)チオ・エステル結合を介するパルミチン酸の付加、(4)リン酸化。平成9年度の本研究では、オリゴマー形成に与かるCys残基の同定を試みている。CM2の細胞外ドメインには25、30および44位の3ヶ所にCys残基が存在する。しかもこれらのすべてが27株のC型ウイルスの間で完全に保存されているので、いずれもが分子内もしくは分子間S-S結合に関与している可能性が強い。そこでまず、C/山形/1/88のCM2遺伝子をSV40後期プロモーター下に組み込み、CV-1細胞でCM2を発現させた。さらに、現在、上記の3ヶ所のCysの少くとも1つをSerに変えるべく変異を導入した7種類の変異cDNAを作製しており、その各々をSV/CV-1系を用いて発現させる予定である。発現させたCM2を抗CM2血清を用いて免疫沈降し、非還元条件下のSDS-PAGEで解析すればオリゴマー形成に与かるCys残基が同定できるものと思われる。

CM2 is a candidate protein for the 6th RNA segment (M gene) of CM2. CM2 has been modified four times during its intracellular transport process. (1)the addition of sugar chains,(2) the formation of intermolecular S-S bonds,(3) the addition of sugar chains,(4) the acidification. In this study, we tried to identify Cys residues in the formation and identity of Cys residues. Cys residues at positions 25, 30, and 44 of CM2 extracellular domain were present. 27 strains of C-type virus were completely preserved in the medium and the middle of the molecule was closely related to S-S binding. The CM2 gene of C/Yamagata/1/88 was detected in SV-40 cells. The Cys of the three sites listed above are currently being developed in advance, with the introduction of 7 different cDNA species. SDS-PAGE analysis of CM2-containing anti-CM2 serum under non-reductive conditions

项目成果

Hongo S.: "Characterization of a second protein (CM2) encoded by RNA segment 6 of influenza C virus." J Virol. 71・4. 2786-2792 (1997)

Hongo S.：“丙型流感病毒 RNA 片段 6 编码的第二种蛋白质 (CM2) 的特征”，J Virol 71·4 (1997)。

Tada Y.: "Evolutionary Analysis of Influenza C Virus M Genes." Virus Genes. 15・1. 53-59 (1997)

Tada Y.：“丙型流感病毒M基因的进化分析。”15・1（1997）。

本郷 誠治: "C型インフルエンザウイルスHE蛋白の構造と機能" 日本臨床. 55・10. 2575-2580 (1997)

本乡精二：“丙型流感病毒HE蛋白的结构和功能”日本临床杂志55・10（1997）。

村木 靖: "C型インフルエンザウイルスのHE遺伝子の分子進化学的研究" 日本臨床. 55・10. 2627-2632 (1997)

Yasushi Muraki：“丙型流感病毒HE基因的分子进化研究”日本临床杂志55・10 2627-2632（1997）。

Asahi Y.: "The Antigenic and Receptor-binding Properties of Influenza C Viruses Adapred to Growth in HMV-II Cells." Yamagata Med. J.15・2. 24-33 (1997)

Asahi Y.：“适应 HMV-II 细胞生长的丙型流感病毒的抗原和受体结合特性”Yamagata Med. 24-33 (1997)。