肝癌患者血液を用いたDNA satellite解析によるLOHの検出

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肝細胞癌の癌組織の4q、16qの染色体領域に認められるloss of heterozygosity(LOH)が、肝細胞癌患者の末梢血血清DNA中に存在するか否かを分析し、肝癌のstageや遠隔転移との関係を検討した。1. 肝細胞癌患者の肝癌組織、非癌部組織からのDNA分離、4q、16qのLOHの検討4q、16qのprimerそれぞれ3個ずつ用い、PCR-based microsatellite polymorphism aIlalysisを試みた。stageIIIの切除肝組織3/5例で4qのLOH/shiftが検出されたが、stageIIの症例では、用いたprimerでは、LOHは認められなかった。2. 肝細胞癌患者の血清からのDNA分離、4q、16qのLOHの検討stageI,stagIIの5例中2例では、血清からのDNA抽出量が、健常人と同レベルと非常に少ないため、PCR-based microsatellite polymorphism analysisを施行不可能であった。stageIIIでLOHが認められた肝切除例3例のうち2例は、末梢血血清からのDNA抽出量不十分のため、分析不可能であった。肺転移、骨転移のあるstageIVb3例中1例のみで、末梢血血清DNA量が著明に増加、染色体4qの1つのprimerを用いた分析でLOHが認められた。末梢血血清からの十分量のDNA抽出は、かなりの血清量を必要とし、困難であった。また、肝細胞癌での4q、16qのLOHの分析では、染色体の広い範囲にわたり数多くのprimerが用いられており、primerの選択にも問題があったと考えられる。