表皮角质形成细胞产生的IL-13的功能分析-猫眼课题宝

表皮角质形成细胞产生的IL-13的功能分析

批准号：

09770645

负责人：

片桐一元

金额：

$1.22万

依托单位：

大分医科大学

依托单位国家：

日本

项目类别：

Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)

财政年份：

1997

资助国家：

日本

项目状态：

已结题

起止时间：

1997 至 1998

来源：

https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770645/

关键词：

サイトカイン mRNA 表皮細胞紫外線ランゲルハンス細胞 IL-13 表皮角化細胞 IL-10 UVB

项目摘要

项目成果

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(目的)前年度までに培養表皮細胞のIL-13mRNAの発現と紫外線による発現増強を確認し,今年度は1.生体内での発現と2.蛋白レベルでの発現を検討した。(方法と結果)1.生体内での発現の確認(a)ヒト皮膚よりディスパーゼにて表皮シートを採取し,トリプシン処理後.抗CD1a,CD3,CD14抗体を用いたnegative selectionにて表皮細胞を,同時にpositive selectionにてランゲルハンス細胞を回収.RT-PCR法にて両細胞にIL-13mRNA発現を認めたが,ランゲルハンス細胞の発現の方が明らかに強かった.(b)PCRにて作成したRNAprobeを用いたin situ hybridization法にて正常表皮細胞にIL-13mRNA発現を確認した.2.蛋白レベルでの検討(a)紫外線照射後,経時的に培養表皮細胞を回収し,ホモゲネート後,ELISA,ウエスタンブロッテイングを施行(b)同細胞を(細胞膜透過処理後,)ポリクローナル,モノクローナル抗体を用いてスライド上での免疫染色,フローサイトメトリによる染色を行う.(a)(b)ともに,IL-13の発現は確認できなかった.(考察)表皮細胞が生体内でもIL-13mRNAを発現していることが明らかになったが,培養表皮細胞では蛋白レベルではIL-13を検出できなかった.蛋白質として産生されない可能性もあるが,発現量が少ない,表皮細胞に存在が知られているIL-13レセプターに捕捉される,代謝されやすい,などの理由により検出できにくいだけかも知れない.今後はIL-13の機能を反映できる細胞系等を利用し,検討する方法が有効かも知れない.また,生体皮膚では表皮細胞だけでなく,むしろ,ランゲルハンス細胞がIL-13mRNAの主要産生細胞細胞であり,その意義は不明ながら,皮膚の免疫システムを考える上で,検討に値すると考えられる.

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专著(0)

科研奖励(0)

会议论文

Hatano Y,Katagiri K et al: "Heterogeneity in expression of cytokine mRNA in freshly isolated peripheral bloodeosinophils of patients with cutaneous diseases associated eosinophilia" Int.Arch.Allergy Immunol. in press.

Hatano Y、Katagiri K 等人：“患有嗜酸性粒细胞增多症相关皮肤病的患者新鲜分离的外周血嗜酸性粒细胞中细胞因子 mRNA 表达的异质性”Int.Arch.AllergyImmunol。

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

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