皮膚線維芽細胞におけるサイトカイン誘導遺伝子及び強皮症特異遺伝子のクローニング

皮肤成纤维细胞中细胞因子诱导基因和硬皮病特异性基因的克隆

• 批准号: 09770667
• 负责人: 小野 雅史
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Kawasaki Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770667/
• 关键词: 強皮症; 線維芽細胞; Differential Display; 繊維芽細胞; surpressive PCR

本研究の目的は、強皮症線維芽細胞が陥っている異常のメカニズムと、それに関わる未知の分子について、正常線維芽細胞の発現遺伝子から遺伝子サブトラクションの手法を用い検討する事である。本年度は、また新たに20種類のプライマーを用いDifferential Displayを行い、Diffuse Sclerodemna 及びMorpheaの皮膚硬化部線維芽細胞に特異的に発現している遺伝子を、健常者線維芽細胞、並びに健常部線維芽細胞と比較、検討した。結果、オートラジオグラフィーで確認されたおよそ3000個のクローンから、特異的に発現している遺伝子として、それぞれ12及び27の遺伝子断片をクローニングした。遺伝子断片の長さは31bpから175bp、平均133bpで、総計3843bpのシーケンシングを行った。その結果をデータベースに参照したところ、病変部から採取された線維芽細胞に特異的に高度に発現している遺伝子の中にCytochrom oxidase及びATPaseにほぼ完全に一致するものが複数含まれていた。この二つの遺伝子はミトコンドリアDNAにそれぞれ別々にコードされている。培養における細胞間の増殖、及び生存率に差がないため、この結果から硬化部の線維芽細胞では、ミトコンドリアDNAの発現が高度に亢進している可能性が考えられた。また、過去に類似した遺伝子の報告のない、全く新たな16個の遺伝子をクローニングしており、これらについては更にシーケンスを精密にし、パテント出願を準備中である。

The purpose of this study was to investigate the use of unknown molecular mechanisms for the development of abnormal and abnormal Scleroderma cells and for the development of normal Scleroderma cells. This year, there are 20 new types of Differential Display, Diffuse Sclerodemna and Morphea skin sclerosity-specific development, normal development, and normal development. The results showed that there were 3000 fragments identified, and there were 12 and 27 fragments identified. The length of the fragment was 31bp, ranging from 175bp to an average of 133bp, with a total length of 3843bp. The results of this study were consistent with those of the cytochromidase and ATPase in the cytochromicity of the cytochromidase and ATPase in the cytochromicity of the cytochromicity. These two genes are called DNA. The proliferation and survival rate of cultured cells are different, and the possibility of DNA production in hardened cells is highly increased. In the past, there were similar reports, and all of them were new. There were 16 reports, and all of them were new reports.