高濃度ブドウ糖条件下ヒト単球培養系におけるインスリンのIL-6産生に及ぼす効果
高糖条件下胰岛素对人单核细胞培养体系IL-6产生的影响
基本信息
- 批准号:09770775
- 负责人:
- 金额:$ 1.34万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:1997
- 资助国家:日本
- 起止时间:1997 至 1998
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
ヒトmonocyte培養系を用いてインスリンがIL-6産生を抑えるかどうかの検討を行った。ヒトmonocyteをディッシュ付着法、比重遠心法で単離し1×10^6/mlに請整し、培養グルコース濃度を11mM、33mMとし、インスリンを100μU、1000μU添加し、6時間37℃5%CO2培養器で培養した。培養後細胞を回収しRNAを抽出後、IL-6mRNAに特異的なプライマーを用いてRT-PCR法で増幅後、アガロースゲルにて電気泳動しエチジウムブロマイドにて染色後紫外線下で撮影し、バンド吸光度をMolecular Dynamics社製のPersonal Densitometer SIで読み取りIL-6mRNA量の比較検討を行った。当初の予想では、インスリン量の増量によりIL-6mRNA量は低下し、その効果は高濃度グルコース下でより著明になるものと考えていた。予備的検討では、そのような傾向も認めたが、結局は実験間でのばらつきが多く結論に至らなかった。そこで次年度においては以下の検討をすることとした。従来までの検討で、我々はヒトmonocyte培養系において高濃度グルコース下ではIL-6mRNA量の増加傾向があることを認め発表した。そこでこの細胞内シグナル伝達は何を介しているのかを検討することとした。
The production of IL-6 was studied by using a monoclonal culture system. Monocyte concentration: 11mM, 33mM, 100μU, 1000 μ U, 6 hours 37℃ 5% CO2 incubator IL-6mRNA was extracted from cultured cells and then amplified by RT-PCR. The RNA was detected under ultraviolet light after staining. The absorbance of IL-6mRNA was measured by Molecular Dynamics 'Personal Densitometer SI. At the beginning, we thought that the amount of IL-6mRNA was low and the concentration of IL-6mRNA was high. The preparation of the investigation is reversed, the tendency is to recognize, the result is reversed, the time is reversed, the conclusion is reached The following is a summary of the results. In recent years, IL-6mRNA levels have increased at high concentrations in monocyte culture systems. This is the first time that we've seen this.
项目成果
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