高濃度ブドウ糖条件下ヒト単球培養系におけるインスリンのIL-6産生に及ぼす効果

点击翻译按钮获取中文摘要

ヒトmonocyte培養系を用いてインスリンがIL-6産生を抑えるかどうかの検討を行った。ヒトmonocyteをディッシュ付着法、比重遠心法で単離し1×10^6/mlに請整し、培養グルコース濃度を11mM、33mMとし、インスリンを100μU、1000μU添加し、6時間37℃5%CO2培養器で培養した。培養後細胞を回収しRNAを抽出後、IL-6mRNAに特異的なプライマーを用いてRT-PCR法で増幅後、アガロースゲルにて電気泳動しエチジウムブロマイドにて染色後紫外線下で撮影し、バンド吸光度をMolecular Dynamics社製のPersonal Densitometer SIで読み取りIL-6mRNA量の比較検討を行った。当初の予想では、インスリン量の増量によりIL-6mRNA量は低下し、その効果は高濃度グルコース下でより著明になるものと考えていた。予備的検討では、そのような傾向も認めたが、結局は実験間でのばらつきが多く結論に至らなかった。そこで次年度においては以下の検討をすることとした。従来までの検討で、我々はヒトmonocyte培養系において高濃度グルコース下ではIL-6mRNA量の増加傾向があることを認め発表した。そこでこの細胞内シグナル伝達は何を介しているのかを検討することとした。