レニンおよびアンジオテンシノーゲン遺伝子発現調節機構についての分子生物学的研究

肾素和血管紧张素原基因表达调控机制的分子生物学研究

• 批准号: 09770791
• 负责人: 田村 功一
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770791/
• 关键词: レニン・アンジオテンシン系; レニン; 腎細胞; 遺伝子発現調節; c-Jun蛋白質; RB蛋白質

c-Jun蛋白質およびRB蛋白質によるレニン遺伝子プロモーターの転写調節に関する検討まず,レニン遺伝子プロモーター領域とCAT遺伝子とのキメラ遺伝子を,c-Jun遺伝子発現ベクターとともに培養腎細胞に遺伝子導入してCAT assayを行い転写活性の変化について検討した.c-Jun蛋白質過剰発現により培養腎細胞特異的に約3〜4倍のCAT活性の増加がみられ,deletion解析によりコアプロモーター領域(-47〜+16)がc-Jun蛋白質による転写活性化に関与することが明らかになった.コアプロモーター領域内のAP-1類似配列を変異させてもc-Jun蛋白質による転写活性化はみられたが,TATAボックスを変異させると定常的およびc-Jun蛋白質による転写活性が著しく低下した.in vivo competition法によって腎細胞内のc-Jun蛋白質の作用を競合阻害すると,c-Jun蛋白質による転写活性化は有意に低下した.これにより,c-Jun蛋白質が細胞特異的にレニン遺伝子の転写活性化作用をもつことが明らかになった.c-Jun蛋白質はコアプロモーター領域結合因子との相互作用によって,レニン遺伝子プロモーターの転写活性化をもたらすと考えられる.次に,レニン遺伝子プロモーター領域とCAT遺伝子とのキメラ遺伝子を,RB遺伝子発現ベクターとともに培養腎細胞に遺伝子導入して転写活性の変化について検討した.RB蛋白質過剰発現により培養腎細胞特異的に約3〜4倍のCAT活性の増加が見られ,deletion解析により転写活性化に関与する近位プロモーター領域(RP-2領域;-75〜47)が明らかになった.また,ゲルシフトアッセイおよびDNase I footprint解析では,RB蛋白質により,RP-2領域への培養腎細胞由来の核内因子の結合活性の亢進が認められた.これらにより,RB蛋白質が細胞特異的にレニン遺伝子の転写活性化作用をもつことが初めて明らかになった.RB蛋白質はRP-2領域結合核内因子との相互作用によって,レニン遺伝子プロモーターの転写活性化をもたらすと考えられ,レニン遺伝子の組織特異的・分化特異的な発現調節にRB蛋白質が関与している可能性が示された.

c-Jun protein and RB protein are involved in the regulation of CAT gene expression and CAT gene expression.c-Jun protein expression is related to the regulation of CAT gene expression and CAT gene expression. c-Jun protein expression is related to the regulation of CAT gene expression and CAT gene expression. c-Jun protein expression is related to the regulation of CAT gene expression and CAT gene expression in cultured kidney cells. Deletion analysis: domain (-47 ~+16): c-Jun protein activation: domain (-47 ~+16): domain (-16): domain (-47 ~+16): domain (-16): domain (-16): domain (-16 ~+16): domain (-16): domain (-16): domain (-16 ~16): domain (-16): domain AP-1-like alignment changes in the domain of c-Jun protein in vivo are different from those in vivo. However, the activity of c-Jun protein in vivo is lower than that in vivo. c-Jun protein plays a role in cell-specific gene activation.c-Jun protein plays a role in cell-specific gene activation.c-Jun protein plays a role in cell-specific gene activation. In addition, there was a 3-to 4-fold increase in CAT activity in cultured kidney cells,deletion analysis, and RB protein overexpression.(RP-2 Field;-75 47). The analysis of DNase I footprint revealed that RB protein was involved in the regulation of RP-2 domain, and the binding activity of nuclear factors in cultured kidney cells was increased. Therefore,RB protein plays an important role in cell-specific gene activation.RB protein interacts with RP-2 domain to bind nuclear factors.RB protein plays an important role in the regulation of cell specific gene activation.

项目成果

Tamura K: "Regulation of cardiac angiotensinogen mRNA in vivo and in vitro." Heart Vessels. Suppl.12. 205-208 (1997)

Tamura K：“体内和体外心脏血管紧张素原 mRNA 的调节。”

Takahashi D: "Relationship between hepatic angiotensinogen mRNA expression and plasma angiotensinogen in patients with chronic hepatitis." Life Sci. 60. 1623-1633 (1997)

Takahashi D：“慢性肝炎患者肝脏血管紧张素原 mRNA 表达与血浆血管紧张素原的关系。”

Umemura S: "Plasma angiotensinogen concentrations in obese patients." Am J Hypertens. 10. 629-633 (1997)

Umemura S：“肥胖患者的血浆血管紧张素原浓度。”

Tomura K: "A novel proximal element mediates the regulation of mouse Ren-1C Promoter by retinoblastoma protein in cultured cells." J Biol Chem. 272. 16845-16851 (1997)

Tomura K：“一种新型近端元件通过培养细胞中的视网膜母细胞瘤蛋白介导小鼠 Ren-1C 启动子的调节。”

Umemura S: "Distribution of α_<1B>-adrenergic receptor mRNA expression along rat nephron segments" Kid Int. 51. 1548-1552 (1997)

Umemura S：“α_<1B>-肾上腺素能受体 mRNA 表达沿大鼠肾单位片段的分布”Kid Int. 51. 1548-1552 (1997)