悪性腫瘍の進展および転移におけるプロテアーゼに役割についての研究

蛋白酶在恶性肿瘤进展和转移中的作用研究

• 批准号: 09770908
• 负责人: 吉田 和美
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770908/
• 关键词: 乳癌; プラスミノーゲンアクティベーター; アデノウイルスベクター; urokinase plasminogen activator; 乳癌細胞

本研究の目的はプロテアーゼの中でも癌の浸潤、転移に関係の深いと思われるurokinase plasminogen activator(uPA)と乳癌との関連を基礎的にuPAを乳癌細胞に強制発現させ、その細胞の浸潤転移能の違いを検討することである。まず、ヒトuPAのfull-length cDNAのクローニングに関してはuPAタンパク中の選択的なペプチドをコードするoligonucleotide5個を化学的に作成した。オリゴマーは^<32>PATPとT4polynucleotide kinaseでラベルし、イオン交換クロマトグラフィーで精製した。二本鎖DNAとバクテリオファージλgt10でのcDNA作成を行ったが、この際有効なクローンが得られず、これにuPAの発現実験につなげることができなかった。基礎実験として、乳癌細胞株やトランスフェクションに使用する293細胞の継代培養を行い、基礎的手技を確立した。これとともに乳癌細胞株の性質を検討するため、各種乳癌細胞株(MCF-7,SKBr3,Au565,MDA-MB-468,MDA-MB-361)をヌードマウス腹腔内に注入し(5×10^6cell/mouse)明らかな腹膜播種はみられなかった。現在クローン化されたuPAを入手し、pAdCMV(S)-BGHpAを使用してトランスフェクト実験を行っている。

The purpose of this study is to explore the relationship between cancer infiltration and metastasis and to explore the relationship between urokinase plasminogen and infiltration of cancer. activator (uPA) is related to breast cancer and is related to the basic uPA, which is a forceful expression of breast cancer cells and the infiltration and migration of breast cancer cells.まず、ヒトuPAのfull-length cDNA のクローニングに关してはuPAタンパク中のペプチドをコードするoligonucleotide 5 をchemically made した.オリゴマーは^<32>PATP and T4 polynucleotide kinase でラベルし, イオン exchange クロマトグラフィーでRefined した.二本 lockDNAとバクテリオファージλgt10でのcDNA成を行ったが、この记Effective なクローンが got られず, これにuPAの発appear実験につなげることができなかった. The basic techniques are established, including the generation of breast cancer cell lines using する293 cells and the establishment of basic techniques. Properties of breast cancer cell lines: various breast cancer cell lines (MCF-7, SKBr3, Au565, MDA-MB-468, MDA-MB-361) Intraperitoneal injection of をヌードマウス(5×10^6cell/mouse) 明らかなPeritoneal seeding of はみられなかった. Currently, クローン化されたuPAを is available, and pAdCMV(S)-BGHpA is using してトランスフェクト実験を行っている.