膀胱癌におけるシスプラチン耐性因子とアポトーシス発現についての究明

膀胱癌顺铂耐药因子及凋亡表达的研究

基本信息

批准号：
09771236
负责人：
近藤幸尋
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Nippon Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では培養膀胱癌細胞株を用いて、シスプラチン感受性と各耐性因子を検討した。シスプラチン耐性膀胱腫瘍細胞のなかで、メタロチオネイン・グルタチオン・グルタチオントランスフェラーゼ・チオレドキシンのすべて各耐性因子が高いものは認めなかったが、各々が独立した耐性因子を演じていると思われた。その結果アポトーシスの発現も各耐性因子間に相関は認められなかった。そこで我々はシスプラチンの耐性因子の一つとして知られているメタロチオネインという蛋白に着目した。メタロチオネイン遺伝子枯渇化マウスを用いて、そのwild type mouseとともに膀胱腫瘍を発生促進するBBNによる膀胱癌の発生頻度を検討した。メタロチオネイン遺伝子枯渇化マウスは膀胱腫瘍の発生頻度が、wild type mouseに比して高かった。また免疫組織化学的には、メタロチオネイン遺伝子枯渇化マウスに比してwild type mouseはhigh stageの腫瘍が多く、膀胱腫瘍の発生頻度は低いものの増殖速度が速いことを裏付けるPCNA陽性細胞が多かった。これらのメタロチオネイン陽性および陰性膀胱腫瘍を培養細胞とすることに成功した。これらの細胞を用いてシスプラチン耐性に関して検討すると、メタロチオネイン遺伝子枯渇化膀胱腫瘍細胞はシスプラチンにより感受性が高く、アポトーシスに陥りやすいことを認めた。しかしこのアポトーシス制御機構の解明は、本研究期間には行うことはできなかった。今後は、メタロチオネインによるアポトーシス制御機構の解明と現在のin vitroで得られた結果と実際の臨床検体の検索により、臨床上の癌化学療法にフィードバックできるようさらなる検討を行う予定である。

在这项研究中，使用培养的膀胱癌细胞系检查了顺铂敏感性和抗性因子。在抗顺铂的膀胱肿瘤细胞中，没有一个金属硫硫代蛋白，谷胱甘肽，谷胱甘肽转移酶或硫氧还蛋白具有高抗性因子，但都认为每种因子都起着独立的抗性因子。结果，凋亡的抗性因子之间未观察到相关性。因此，我们专注于一种称为金属硫硫蛋白的蛋白质，该蛋白质被称为顺铂的抗性因子之一。我们研究了使用金属硫蛋白基因基因的小鼠以及野生型小鼠，研究了由BBN引起的膀胱癌的频率，该BBN促进了膀胱肿瘤的发育。金属硫硫蛋白基因缺失的小鼠的膀胱肿瘤频率高于野生型小鼠。此外，从免疫组织化学上讲，野生型小鼠的高阶段肿瘤比金属硫蛋白基因基因的小鼠更高，尽管膀胱肿瘤不太常见，但有更多的PCNA阳性细胞证实了快速生长的速度。这些金属硫硫蛋白阳性和阴性膀胱肿瘤已成功用作培养细胞。当使用这些细胞研究顺铂耐药时，发现金属硫蛋白基因基因基因的膀胱肿瘤细胞更容易受到顺铂的影响，并且更容易受到凋亡的影响。但是，在本研究期间，这种控制凋亡的控制尚不清楚。将来，我们计划进一步研究金属硫硫蛋白控制凋亡的机制，并搜索在体外和实际临床样本中获得的当前结果，以提供临床癌症化学疗法的反馈。