胎盤増殖因子遺伝子の転写調節領域解析による胎盤特異的転写因子の検索と分化との関連

通过分析胎盘生长因子基因转录调控区寻找胎盘特异性转录因子及其与分化的关系

• 批准号: 09771268
• 负责人: 野村 誠二
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771268/
• 关键词: 胎盤増殖因子; ヒトゲノムライブラリー; クローニング

1. 胎盤増殖因子(PIGF)第1エクソンに含まれる230bpフラグメントをラベリングし、これをプローブとして、ヒトゲノムライブラリーよりスクリーニングを行った。1、000、000のファージから開始し第3次スクリーニングを経て6個のファージをクローニングすることに成功した。制限酵素地図より、これらは互いにoverlapしていると予想された。次いで、それぞれのファージからDNA抽出を行いシークエンス解析及びプロモーター活性測定を順次施行中である。更にFoot print法及びgel shift assay法を行いPlGF発現に重要と予想される転写因子を検索するため、現在、胎盤、絨毛癌細胞、肝細胞などより核蛋白抽出を行っている。2. PlGF免疫測定系を用い、正常妊婦153例、胞状奇胎患者13例の血清中PlGF濃度を測定した。結果は正常妊婦では妊娠初期7週に67.8 pg/mlのピークを持ち以下漸減し、妊娠中期以降では平均8.5pg/mlとほぼ測定感度付近で一定であった。これに比し、胞状奇胎患者では同時期の正常妊婦に比べ血清PIGF濃度は有意に高値を示し平均272pg/mlであったが、続発性絨毛疾患である侵入奇胎の発生と血清PIGF濃度は相関がなかった。3. 定量的RT-PCR法により測定した胞状奇胎組織中のPlGF mRNA量が続発性絨毛疾患の発生予知に有用かどうか検討したが、続発率とPlGF mRNA量の間に相関関係は認めなかった。

1. PIGF gene 1 contains 230bp DNA sequence, which can be used for DNA sequencing. 1, 000, 000 The restriction enzyme is in the middle of the process. In the middle of the second phase, the DNA extraction was performed in sequence, and the DNA activity was measured in sequence. In addition, Foot print and gel shift assay are used to detect the expression of PlGF in human placenta, chorionic carcinoma cells and hepatocytes. 2. PlGF immunoassay was used to determine serum PlGF concentrations in 153 normal pregnant women and 13 patients with fetal dysplasia. Results: The sensitivity of normal pregnant women decreased gradually from 67.8 pg/ml to 8.5 pg/ml in the first 7 weeks of pregnancy, and decreased gradually from 8.5 pg/ml to 8.5 pg/ml in the second trimester. The serum PIGF concentrations of women with congenital and cellular abnormalities were significantly higher than those of normal pregnant women at the same time, averaging 272pg/ml. 3. Quantitative RT-PCR method to determine the amount of PlGF mRNA in cellular fetal tissues is useful for understanding the development of chorionic villi diseases. The correlation between development rate and PlGF mRNA amount is well established.

项目成果

Seiji Nomura: "Serum And Tissue Vascular Endothelial Growth Factor Levels in Hydatidiform mole." Life Sciences. 63. 1793-1804 (1998)

Seiji Nomura：“葡萄胎中的血清和组织血管内皮生长因子水平。”