シクロオキシゲナーゼ及びリポキシゲナーゼの情報伝達及び細胞障害防御における役割

环氧合酶和脂氧合酶在信号转导和细胞毒性防御中的作用

• 批准号: 09771542
• 负责人: 大西 佳子
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771542/
• 关键词: SK-N-SH; neuroblastoma; リポキシゲナーゼ; アセチルコリン; ムスカリン様受容体; 過酸化水素; caspase; カルシウム; 腸管; 平滑筋; 収縮; シクロオキシゲナーゼ

中枢神経活動の変化の中でも、特に、加齢や病態におけるacetylcholine(ACh)のシグナル伝達の低下減少に興味を持ち、M3受容体を介するアラキドン酸代謝物の生理的役割を追求すべく研究を行っている。今回、培養ヒトneuroblastomaのcell line.SK-N-SHを用いて、アラキドン酸カスケードの5-lipoxygenaseやその代謝物について、細胞障害に関わるかどうかを検討し、以下の知見を得た。(前回、アラキドン酸カスケードの5-lipoxygenaseやその代謝物が、腸管縦走平滑筋のAChの収縮(M_3受容体)におけるCa^<2+>流入に関与する可能性を報告。)1. 5-lipoxygenaseの阻害剤、AA861はMTT(3-(4,5-dimethyl-thiazole-2-yl)-2,5-diphenyl tetrozolium bromide) assayにおいて細胞増殖を抑制した。2. 5-lipoxygenaseの代謝物leukotriene D_4(LTD_4)のantagonist、MK571はMIT assayにおいて細胞増殖を抑制した。3. H_2O_2はMTT assayにおいて細胞増殖を抑制した。4. H_2O_2による処置によりcaspaseの活性を認めなかった。以上の結果より、M_3受容体の情報伝達の一部を担う5-lipoxygenaseや5-lipoxygenaseの代謝物が細胞障害にも関与する可能性が示唆された。一方、細胞死の指標の一つであるcaspaseの活性については、positive controlとして使用したH_2O_2もその活性を認めなかった。このことに関しては、spectrofluorometerの不調によるものか(実際、酵素活性表示のためのAMC単独で蛍光表示を示さなかった。)、過酸化水素のcaspaseに対するdual regulation効果(FEBS L.1997)によるものか、あるいは、cell line.SK-N-SHの特性によるものかについて検討中である。

Changes in central nervous activity in the middle, middle In this paper, the cell line.SK-N-SH of cultured neuroblastoma was investigated. The following findings were obtained. (Report the possibility of Ca^<2+> influx into the anterior loop, 5-lipoxygenase metabolites, and ACh contraction (M_3 receptor) of intestinal smooth muscle.) 1. 5-lipoxygenase inhibitor, AA861 inhibited cell proliferation in MTT(3-(4,5-dimethyl-thiazole-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) assay. 2. 5-lipoxygenase metabolites leukotriene D_4(LTD_4) and MK571 inhibit cell proliferation in MIT assay. 3. H_2O_2 inhibited cell proliferation by MTT assay. 4. H_2O_2-induced caspase activity was detected. These results indicate that part of the information transmission of M_3 receptor is related to the cell damage caused by 5-lipoxygenase and its metabolites. One side, cell death index one The enzyme activity is expressed in AMC and the fluorescence is expressed in AMC alone. The dual regulation effect of peracidified water on caspase (FEBS L.1997) is discussed in the characteristics of SK-N-SH.

项目成果

Kamata,Y.: "Possibility of hydrogen peroxide deplete reduced glutathione and leukotriene C_4 and D_4 under contactile response in guinea-pig ileal smooth muscle." Journal of Neurochemistry. 69,suppl.S29A (1997)

Kamata,Y.：“在豚鼠回肠平滑肌的接触反应下，过氧化氢可能会消耗还原型谷胱甘肽和白三烯 C_4 和 D_4。”

大西佳子: "モルモット摘出腸管におけるacetylcholineの収縮と5-lipoxygenase代謝産物との関係" 歯科基礎医学会雑誌. 40,suppl.96(364) (1998)

Yoshiko Onishi：“离体豚鼠肠道中乙酰胆碱收缩和 5-脂氧合酶代谢物的关系”日本基础牙科医学会杂志 40，suppl.96（364）（1998）

鎌田佳子: "モルモット摘出腸管におけるH_2O_2と5-lipoxygenaseの関係" 歯科基礎医学会雑誌. 39,suppl.172(508) (1997)

Yoshiko Kamata：“豚鼠离体肠道中 H_2O_2 和 5-脂氧合酶的关系”日本基础牙科医学会杂志 39，suppl.172(508) (1997)。

大西佳子: "5-lipoxygenaseのモルモット摘出腸管におけるacetylcholine収縮のCa^<2+>流入に関わる可能性" 日本神経精神薬理学会年会発表要旨集. 98 (1997)

Yoshiko Onishi：“5-脂氧合酶参与豚鼠离体肠道乙酰胆碱收缩Ca^2+流入的可能性”日本神经精神药理学会年会记录98(1997)。