翼状片の成因に関する研究ー低線量紫外線の角膜上皮細胞,翼状片由来線維芽細胞におけるサイトカイン産生に及ぼす影響ー

翼状胬肉发病机制研究 - 低剂量紫外线对角膜上皮细胞和翼状胬肉来源成纤维细胞细胞因子产生的影响 -

• 批准号: 10770929
• 负责人: 中神 哲司
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Hamamatsu University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770929/
• 关键词: 翼状片; 紫外線; サイトカイン; Stem cell factor (SCF)

1.前年度樹立した正常結膜上皮細胞,正常結膜線維芽細胞,翼状片由来上皮細胞,翼状片線維芽細胞,結膜上皮細胞株,角膜上皮細胞株各々の培養細胞より抽出したRNAをRT-PCR法で検討した結果,すべての細胞から可溶型,および膜結合型両者のstem cell factor (SCF)のmRNAを検出した.線維芽細胞ではそのほとんどが可溶型のmRNAであった.一方角結膜および翼状片上皮細胞では膜結合型の比率が線維芽細胞に比較して高かった.各々の培養上清および細胞溶解液中のSCF濃度をELISA法にて検討した結果,培養上清中の単位細胞あたりのSCF濃度は線維芽細胞に多かったが,細胞溶解液では上皮系細胞で顕著に認められた.また線維芽細胞培養液にIL1-βを加えることで可溶型SCFの産生が増加した.この結果から,結膜線維芽細胞は主に可溶型SCFを産生し,眼表面炎症疾患等で結膜下組織および涙液中にSCFを拡散し肥満細胞の活性化に関与し,上皮細胞では主に膜結合型SCFを産生することで、上皮内肥満細胞遊走に関与していると推測された.2.培養角結膜上皮細胞株,結膜線維芽細胞に閾値下(細胞死を惹き起こさない程度の)紫外線を照射し,照射24時間後の培養上清中のIL-1β,IL-6,TNF-α,SCF各濃度をELISA法で検討した.IL-1βは紫外線照射により濃度の上昇を見たが,いずれも有意差を認めなかった.今後細胞内サイトカイン量を検討する必要があると考えられる.

1. The mRNA of stem cell factor (SCF) was detected by RT-PCR from cultured normal conjunctival epithelial cells, normal conjunctival line fibroblasts, wing-derived epithelial cells, wing-derived line fibroblasts, conjunctival epithelial cell lines and corneal epithelial cell lines. The soluble form of mRNA is expressed in the germ cells. The ratio of membrane-bound epithelial cells in a square conjunctiva to wing-like epithelial cells is higher than that in linear bud cells. The SCF concentration in culture supernatant and cell lysate was determined by ELISA. The SCF concentration in culture supernatant and cell lysate was determined by ELISA. The production of soluble SCF increased with the increase of IL1-β in cell culture medium. The results showed that the production of soluble SCF in conjunctival cells was mainly related to the activation of SCF in subconjunctival tissues and fluid, and the production of membrane-bound SCF in epithelial cells was mainly related to the migration of epithelial cells. IL-1β,IL-6,TNF-α and SCF concentrations in culture supernatant after UV irradiation for 24 hours were measured by ELISA.IL-1β concentrations increased significantly under UV irradiation. In the future, it is necessary to examine the amount of protein in the cell.