アビオトロフィア属細菌マイトジェンのスーパー抗原共通アミノ酸配列を応用した検索

使用 Abiotropea 细菌有丝分裂原超抗原的常见氨基酸序列进行搜索

• 批准号: 10771191
• 负责人: 金本 大成
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10771191/
• 关键词: Abiotrophia; viridans streptococci; staphylococcal enterotoxin; super antigen; ELISA; mitogen; BrdU; abiotrophia

アビオトロフィア属の多様な病原性を説明する因子としてスーパー抗原産生能に着目した。昨年度のスクリーニングでは、4株が細菌性スーパー抗原モチーフペプチドに対する反応性を示し、スーパー抗原活性を持つ可能性が示唆された。Westernblot法による解析では、この抗血清と反応する成分の分子量は約43kDaであった。今年度は、培養上清成分のヒト末梢血T細胞に対するマイトジェン活性を以下のアッセイ系で評価した。・ヒトPBMCよりナイロンウールカラム法でT細胞と分離する。・ガンマ線照射で増殖能を奪った抗原提示細胞と共に供試菌株の培養上清を加えてT細胞を96wellのカルチャープレートで3日間培養する。・BrdUを培地に加え4時間後の各wellにおける細胞へのBrdUの取り込み量をanti-BrdU抗体を用いたELISA法で測定、T細胞増殖の程度を評価する。・T細胞増殖の陽性対照、陰性対照との比較より供試菌株培養上清のマイトジェン活性を評価する。スクリーニング陽性株、陰性株、そして陽性対照としてStaphylococcus aureusスーパー抗原産生株について培養上清のマイトジェン活性を調べたところ、S.aureusには強力なマイトジェン活性が認められたが、Abiotrophiaにおいてはスクリーニング陽性、陰性にかかわらず培養上清単独ではマイトジェン活性はほとんど認められなかった。スクリーニング陰性株であるA.elegans HHC5株においては、PBMCに対するPHA等のマイトジェン活性をむしろ抑制することが観察された。しかしながら、スクリーニング陽性株であるA.defectiva YTS2株は単独では活性を示さなかったが、マイトジェンの存在下でマイトジェン活性を増強する作用を持つことが認められた。

A variety of pathogenicity factors and antigen production factors affect the development of the disease. In the past year, four strains of bacterial antigens were isolated and the possibility of their antigenicity and antigenic activity was demonstrated. Analysis by Western blot showed that the molecular weight of the antiserum and antiserum components was approximately 43kDa. This year, the supernatant components of peripheral blood T cells were evaluated for their activity. PBMC separation method The culture supernatant of T cells was added to the culture supernatant of T cells. BrdU was cultured for 4 hours, and the amount of BrdU in cells was measured by ELISA. The degree of T cell proliferation was evaluated. Comparison of T cell proliferation between positive and negative controls and evaluation of cell activity in culture supernatants of test strains The positive strain, the negative strain, the positive control strain, the S. aureus, the antigen-producing strain, the culture supernatant, the active control strain, the S. aureus, the Abiotrophia, the positive control strain, the negative control strain, the culture supernatant, the active control strain, the S.aureus, the Abiotrophia, the Abiotrophia. A.elegans HHC5 strains were detected for inhibition of PHA activity by PBMC. A.defectiva YTS2 strain showed higher activity than A.defectiva YTS2 strain in the presence of A.defectiva YTS.

项目成果

S.Sato,T.Kanamoto and M.Inoue: "Abiotrophia elegans strains comprise 8% of the nutritionally variant streptococci isolated from the human mouth."Journal of Clinical Microbiology. 37. 2553-2556 (1999)

S.Sato，T.Kanamoto%20and%20M.Inoue:%20"Abiotropicia%20elegans%20strains%20comprise%208%%20of%20the%20nutritionally%20variant%20streptococci%20isolated%20from%20the%20 human%20mouth。"期刊

T.Kanamoto,S.Sato and M.Inoue: "Genetic Heterogeneities and Phenotypic Characteristics of Strains of the Genus Abiotrophia and Proposal of Abiotrophia para-adiacens sp."Journal of Clinical Microbiology. 38. 492-498 (2000)

T.Kanamoto、S.Sato 和 M.Inoue：“Abiotropicia 属菌株的遗传异质性和表型特征以及 Abiotropia para-aiacens sp 的建议”临床微生物学杂志。