权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

ワイル病病原体レプトスピラのゲノム解析および臨床診断への応用研究

威尔氏病病原体钩端螺旋体基因组分析及临床诊断应用研究

基本信息

批准号：
10771305
负责人：
高橋幸江
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Fukuyama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10771305/
关键词：
レプトスピラワイル病ゲノム解析 PCR Vプトスピラ

项目摘要

レプトスピラはワイル病の病原体で医学的に重要な細菌であるにもかかわらず、分子生物学的研究は他の細菌にくらべ著しく遅れている。本研究では日本のワイル病患者から分離された株の染色体のサイズを決定し、その遺伝子地図を明らかにした。この株の染色体は約4.6メガ塩基対と約350キロ塩基対の環状分子からなることが解った。この染色体構成は他のレプトスピラ分離株と同じであったが、遺伝子座についてはそれぞれの株で異なっていた。またレプトスピラのリボソームRNA遺伝子は染色体上に散在していることを本研究で作成した遺伝子地図により確認した。この中で5S rRNA遺伝子は他のリボソームRNA遺伝子が2分子であるのに対し1分子しか存在せず、染色体複製開始領域と考えられる近くに位置していたためこの遺伝子近傍の遺伝子構成を解析した。5S rRNA遺伝子を含む約25キロ塩基対の塩基配列を決定した。この領域内には複製開始点は認められなかったが、塩基配列から得られたORFには脂肪酸代謝に関与する酵素と高い相同性を示すものがありレプトスピラが炭素源あるいはエネルギー源として長鎖脂肪酸を必要とすることとの関連が推察された。また、この株の染色体は制限酵素KpnIでの切断により4.8キロ塩基対の特徴的な断片を生じる。この断片を含む約9.1キロ塩基対の塩基配列を決定した。この断片は染色体上に約20コピーあり特定の領域に集中し繰り返して存在していること、コピー数は異なるものの他の病原レプトスピラ種にも分布していることを明らかにした。そこでこの配列を標的としたPCRを行い、病原レプトスピラ種で特異的に増幅産物が得られること、検出感度が通常の染色体上の遺伝子を標的にした場合の約10倍高感度であることを確認した。以上の結果から、この配列はレプトスピラ感染症の簡便で迅速な臨床診断に有望であることが明らかになった。

In the study of molecular biology, the pathogens of diseases, pathogens, pathogens, pathogens and molecular biology In this study, patients were separated from each other in Japan, and their chromosomes were isolated from each other. The chromosomes of the two strains were about 4.6 and 350, respectively, and the environmental molecules were sequenced. The chromosome of the plant was formed into the same strain as the isolated plant and the constellation of the same plant. The chromosomes of the children were scattered on the chromosomes of the RNA children. This study was made into a confirmation report. In the field of chromosome replication, there is an analysis of the location of the 5S rRNA in the field of DNA replication in the field of molecular genetic analysis. In the field of chromosome replication, there is an analytical analysis of the location of the molecular weight in the field of chromosome replication. The 5s rRNA gene contains about 25 percent of the total number of elements in the base column. In the field, it is necessary to analyze the content of fatty acids in the field, the starting point, the starting point and the starting point in the field. The chromosomes of the two strains were used to make restriction enzyme KpnI, cut off the fragments of the gene that were special in nature. The fragment contains about 9.1 percent of the basic data. About 20 times on the chromosome of the fragment, there is a significant increase in the number of pathogens and the distribution of pathogens in a specific field. The PCR lines of the pathogens, the pathogens, the specific objects of the disease, the sensitivity, and the sensitivity of the cells on the chromosomes are about 10 times as high as that of the pathogens. As a result of the above results, it is expected that the symptoms of infection will be affected rapidly and the bed will be cut off quickly.