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ゲノム情報を活用したラン藻のクロロフィル供給制御機構の解析

利用基因组信息分析蓝藻叶绿素供应控制机制

基本信息

批准号：
11740445
负责人：
藤田祐一
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

クロロフィル(Chl)は、光合成の光反応に必須の色素である一方、光照射により細胞に重篤な傷害をもたらすラジカルを形成する危険な分子でもあるため、細胞はその合成を厳しく制御していると考えられる。その合成制御機構を明らかにする上で、Chl合成系の各過程の生化学的諸性質を明らかにする必要がある。藻類や裸子植物の暗所での緑化を決定づけている光非依存性プロトクロロフィリド(Pchlide)還元酵素(DPOR)は、その推定構造遺伝子の相同性から、ニトロゲナーゼと類似した酵素であることが指摘されてきたが、その酵素的実体は不明であった。筆者は、光合成細菌Rhodobacter capsulatusを用いて、本酵素のアッセイ系を確立した。また、その推定サブユニットをSタグ蛋白質として同細菌で大量発現させ、精製蛋白質を用いた再構成系を確立することにより、1)サブユニット組成(BchLからなるL-コンポーネントとBchNとBchBで構成されるNB-コンポーネントの両方が要求される)、2)還元力としてジチオナイトを要求する点、3)Mg-ATPを要求する点、においてDPORがニトロゲナーゼと共通した性質を有することを世界に先駆けて明らかにした。さらに、シャトルベクターを活用することにより、その発現レベルをさらに改善し、4)L-コンポーネントが鉄硫黄センターを有すること、5)NB-コンポーネントが基質Pchlideの結合部位を有すること、6)活性がニコチンアミドで阻害される、などの本酵素の諸性質を明らかにしつつある。

It is necessary to determine the color of the pigment in the cells of the photoperiod (Chl) and the photochemical reaction of the photoperiod. The cells of the irradiated cells are not sensitive to the formation of dangerous molecules, and the synthesis and control of the cells are important. The synthetic system makes it clear that Chl synthesis is an important part of the biochemical process of biochemistry. In the dark, algae gymnosperms determine that the light is not dependent on the expression of Pchlide (DPOR), which is presumed to be the same as that of Gymnospermae. The photosynthetic bacteria Rhodobacter capsulatus was used and this enzyme was used to confirm the growth of the enzyme. It is presumed that a large number of homozygous bacteria have been detected, and that the protamine protein has been reconstructed by the same bacteria. The results are as follows: 1) the composition of the protein (BchL) has been established. (1) the composition of the protein (BchL) has been established. (1) the composition of the protein (NB-) has been detected in a large number of samples. 2) additional information is required. 3) Mg-ATP requirements are required, and the DPOR requirements are more common. The world is more sensitive. In this study, we found that there was an increase in the number of bacteria in the binding site of the Pchlide, and 6) in the combination site of the gene Pchlide, there was a positive reaction in the combination of the enzyme, and the enzyme.