鉄欠乏オオムギ根特異的発現遺伝子のイネへの導入

将缺铁大麦根系特异性表达基因引入水稻

• 批准号: 11760043
• 负责人: 中西 啓仁
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11760043/
• 关键词: ムギネ酸; 鉄欠乏; 石灰質アルカリ土壌; 根; 形質転換イネ; オオムギ; ニコチアナミン; 遺伝子発現

平成11年度には,イネへの導入用プラスミド,鉄欠乏オオムギの根からムギネ酸合成系酵素のうちニコチアナミン合成酵素(NAS),ニコチアナミンアミノ基転移酵素(NAAT)の遺伝子,また,鉄欠乏時にムギネ酸生合成に大きく関わっているであろうアデニン・リボースリン酸転移酵素(APRT)遺伝子を鉄欠乏特異的発現遺伝子Ids3のプロモーター領域約2.2kbpの下流につないだコンストラクト(Ids3 5'-NAAT-Ids3 5'-NAS),(Ids3 5'-NAAT-Ids3 5'-NAS-Ids3 5'-APRT)を作成し,これらをアグロバクテリウム法にてイネカルスに導入し,さらに薬剤(ハイグロマイシン)を用いた耐性カルスの選抜,再分化個体の育成までを行った.本年度では,これらの植物体を成熟させ,それぞれのコンストラクトを持つ形質転換イネをそれぞれ数〜数十系統得ることができた.それぞれ数系統ずつを選び,抗生物質の入った選択培地で発芽させ,発芽したものをさらに育成し,草丈が約20〜30cmになったものを石灰質アルカリ土壌に植え,鉄欠乏耐性試験を開始した.石灰質アルカリ土壌での生育試験開始後2週間は野生型と形質転換体で大きな差は見られなかった.しかし,その後の生育では,形質転換体のうちのいくつかの系統は野生型と比較して良好な生育を示すものがあった.とくに,NAATを導入した系統では生育がよかった.また,APRTを導入したものでは,初期の生育は良く,分けつも盛んであったが,鉄欠乏耐性能を得ることはなかった.NASを導入した系統では,生育の良いものと悪いものとができて,この遺伝子の発現制御が非常に微妙であることが分かった.現在,今回の石灰質アルカリ土壌検定試験で良好な生育を示した系統についてさらなる解析を行っている.

In 2011, the enzyme for the introduction of protein, protein. Iron deficiency is the most important factor in the production of acid. Acid shift enzyme (APRT) is the most important factor in the production of acid. Ids3 is the most important factor in the production of acid in iron deficiency. The downstream region is about 2.2kbp.(Ids3 5'-NAAT-Ids3 5'-NAS),(Ids3 5 '-NAAT-Ids3 5'-NAS-Ids3 5'-APRT) are created, and the selection of tolerance groups and the breeding of differentiated individuals are carried out. This year, the plant body is mature, and the number of species and quality of the plant body are increased. In addition, the number of antibiotics in the selection system is about 20 ~ 30 cm, the number of antibiotics in the selection system is about 20 ~ 30cm, and the number of antibiotics in the selection system is about 30cm. 2 weeks after the start of calcareous soil fertility test, wild type and qualitative change were observed. After the birth, the system of physical and chemical changes shows that the wild type has relatively good fertility. NAAT is introduced into the system. In addition,APRT is introduced into the system, and the early stage of fertility is not good, and the iron deficiency tolerance can be obtained.NAS is introduced into the system, and the fertility is not good, and the development of the offspring is very delicate. Now, the calcareous soil samples are tested for good fertility.

项目成果

Hiromi Nakanishi: "Two dioxygenase genes, Ids3 and Ids2, from Hordeum vulgare are involved in the biosynthesis of mugineic acid family phytosiderophores."Plant Molecular Biology. 44. 199-207 (2000)

Hiromi Nakanishi：“来自大麦的两个双加氧酶基因 Ids3 和 Ids2 参与麦根酸家族植物铁载体的生物合成。”植物分子生物学。

Takanori Kobayashi: "In-vivo evidence that Ids3 from Hordeum vulgara encodes a dioxygenase that converts 2'-deoxymugineic acid to mugineic acid in transgenic rice."Planta. (in press). (2001)

Takanori Kobayashi：“体内证据表明来自大麦的 Ids3 编码一种双加氧酶，可在转基因水稻中将 2-脱氧麦根酸转化为麦根酸。”Planta。