キョウチクトウ中毒の指標となる強心配糖体関連物質の検索および分析法の確立

夹竹桃中毒指标强心苷相关物质的搜索和分析方法的建立

基本信息

  • 批准号:
    11770234
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.22万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    1999
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1999 至 2000
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

キョウチクトウ中毒の生体試料からの証明を目的に,oleandrin(OLAN)とその関連化合物であるdesacetyloleandrin(DAON),oleandrigenin(OLAG),gitoxigenin(GITG)の分析法を質量分析計付き高速液体クロマトグラフィー(LC-MS)を用い検討し,実試料の分析に応用した.装置はsonic spray ionization interface付きModel M-8000 Hitachi LC/3DQMS SystemとGH-C18(III)column(2.1mmID×150mm,Hitachi)を,移動相は60%メタノールを使用した.抽出法:血液1mlにH_2O 4mlと内部標準として1μg/mlのDigitoxigeninのアセトニトリル溶液100μlを加え,1-クロロブタン2mlで3回抽出した.1-クロロブタン層を濃縮乾固し,残渣を80%メタノール0.5mlに再溶解した後,ヘキサン1mlで2回洗浄し,濃縮乾固した.残渣を移動層100μlに再溶解後,高速遠心し上澄5μlをLC-MSに注入した.結果:本分析法での血液の検出下限はGITGが10ng/ml,他の化合物が5ng/mlで,回収率はいずれの化合物も69.2-86.9%の範囲内であった.本法を実測に応用したところ,血液からOLANが9.7ng/ml検出され,そのピークに関してMS/MSを行ったところ,スペクトルが標品のOLANと一致した.当初OLANより高濃度で検出されると予想したDAONや,他の関連化合物であるOLAG,GITGは検出されなかった.髄液からも血液とほぼ同濃度のOLAN10.1ng/mlが検出された.
To prove the toxicity of oleandrin(OLAN) and related compounds desacetyloleandrin(DAON),oleandrigenin (OLAG),gitoxigenin(GITG) in biological samples, analytical methods for mass analysis of oleandrin (OLAN) and related compounds were developed. Model M-8000 Hitachi LC/3DQMS System GH-C18(III)column(2.1mmID×150mm,Hitachi), mobile phase 60% Extraction method: 1ml of blood, 4ml of H_2O, 1μg/ml of Digitoxigenin, 2ml of Digitoxigenin, 100μl of Digitoxigenin, 2 ml of After 100μl of residue was dissolved, 5μl of residue was injected into LC-MS at high speed. Results: The detection limit of GITG was 10ng/ml, the recovery rate of other compounds was 5ng/ml, and the recovery rate was 69.2-86.9% within the range of 10 ng/ml. This method was used to detect the presence of OLAN in blood at 9.7 ng/ml, and the presence of OLAN in MS/MS was consistent with the presence of OLAN in blood. At the beginning, OLAN was detected at high concentrations, and other related compounds were detected at high concentrations. OLAN10.1ng/ml was detected at the same concentration in the blood.

项目成果

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