クリプトコックス病原性遺伝子クローニングと解析

隐球菌毒力基因克隆与分析

• 批准号: 11770308
• 负责人: 東山 康仁
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770308/
• 关键词: Cryptococcus neoformans; PCRsubtraction; 病原性

Cryptococcus neoformansは基礎疾患を有しない患者にも肺クリプトコックス症や髄膜炎を発症することから菌自体の病原性も問題となっている。その病原性をRNAレベルで解析するために以下の実験を行っている。昨年度には、病原性の強い菌(臨床分離株YC11)と弱い菌(臨床分離株YC13)からFast RNA kit(Bio101,Vista,CA)を用いてプロトコールに従ってC.neoformans cellsからRNAを抽出し、キットを用いてPCRsubtractionを行った。そこで選択された大腸菌コロニーは約40個分離された。本年度は、それらの分離された遺伝子を解析したところ、現在アメリカスタンフォード大学が中心に全世界度行われているゲノムプロジェクトで判っているC.neoformans遺伝子と一致したものは、4遺伝子であり、その他は未知なものであった。YC-11とYC-13で遺伝子の発現の差が認められたのは、2遺伝子であり、そのなかで一つはC.neoformansのヒートショックプロテイン(HSP)70と一致しており、この遺伝子が病原性に関与していることが示唆された。現在、これらの遺伝子をクローニングし、その機能についても解析中である。

Patients with Cryptococcus neoformans underlying diseases are suffering from lung disease, pneumonia, meningitis, bacterial autologous pathogenicity, and etiology. The pathogenicity of RNA was analyzed in this paper. Last year, pathogenic strong bacteria (bed isolates YC11), weak bacteria (bed isolates YC13), weak bacteria (Bio101,Vista,CA) were used to extract C.neoformans cells, RNA, and PCRsubtraction, respectively. We have selected about 40 quarantined strains for the detection of major bacteria. This year, we are divided into two groups. This year, we are in the center of universities around the world. We are now in the center of the world. We are not sure that we are in the same position as we are in this year's C.neoformans. YC-11