糖鎖レクチン接着反応を用いた新たな造血幹細胞の分離法の開発

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各種造血幹細胞の各種糖鎖の発現に関して検討を行った。用いた糖鎖はビニル系高分子に結合しており、さらに、発色剤としてFITCをラベルしたものを用いた。造血幹細胞は、CD34陽性細胞とし、PEラベルされた抗CD34抗体を用いて検出した。用いた糖鎖は、ラクトース、カルボキシル化ラクトース、マルトース、メリビオース、グルコース、マンノビオース、N-アセチルキトビオース、ラミナリビオース、セロビオース、開環グルコースび9種類である。CD34と各種糖鎖の2重染色を行い、フローサイトメトリーにて臍帯血、骨髄、末梢血内の細胞を用いてそれぞれの幹細胞の特徴を比較検討した。その結果、臍帯血、末梢血、骨髄中幹細胞はいずれも、N-アセチルキトビオースを強く発現し、他の糖鎖はほとんど発現していなかった。臍帯血、骨髄中幹細胞は、末梢血中幹細胞に比較して、N-アセチルキトビオース発現は強い傾向がみられた。また、これら幹細胞を24時間G-CSFとともに培養した後各種糖鎖発現の変化をみたが、やはり発現しているのはN-アセチルキトビオースのみであり、培養前、培養後で大きな変化は認められなかった。今後は、大豆レクチンと反応させた場合に糖鎖発現が幹細胞ポピュレーションだけでなく、種々の細胞でそのように変化するか比較検討する予定である。