膵ランゲルハンス島移植における選択的肝動脈注入法の検討

糖尿病の治療に膵ランゲルハンス島(ラ島)移植があり,昨年度より,セルディンガー法を利用したラ島の選択的肝動脈注入法を試みている.昨年度は,血糖のコントロールが不十分でラ島数の不足が考えられた.今年度はdonorを2匹とし,ラ島数を増やし移植を試みた.1.膵臓全摘出による糖尿病犬の作成およびラ島の単離昨年度と同様に犬(体重15〜20Kg)を使用し,全身麻酔下で開腹した.十二指腸は温存し,膵臓全摘出術を施行.次に摘出した膵臓からラ島を単離した.保存液から膵臓を取り出し,膵管にHBSSで溶解したコラゲナーゼを注入し,膵臓を膨化させた.その後,膵臓を細切し,HBSS液で10分間37℃にてdigestionする.次に60分間程度冷温でdigestionを行う.最後にFicoll液で濃度勾配法を用いてラ島のみを単離した.ラ島はRPMI1640培地に入れ,5%CO_2,37℃の条件下で培養した.2.ラ島の移植膵臓全摘出し3〜4週後,糖尿病(血糖が300mg/dL以上)になった犬をrecipientとした.全身麻酔下で透視を用い犬の右鼠径部からRHカテーテルをセルディンガー法で挿入し,ガイドワイヤーを使用して選択的に肝動脈にRHカテーテルを挿入した.培養後,凍結保存していたラ島を溶解し,生理食塩水3ccに入れ,RHカテーテル内を通し肝臓内にラ島を移植した.ラ島数は300000〜400000islet equivalents(IEQ)とし,昨年度より数を増やし移植を試みた.しかし,移植の効果を認めるまでには至っておらず,今後さらに検討していく予定である.

糖尿病の治療に膵ランゲルハンス島(ラ島)移植があり,昨年度より,セルディンガー法を利用したラ島の選択的肝動脈注入法を試みている.昨年度は,血糖のコントロールが不十分でラ島数の不足が考えられた.今年度はdonorを2匹とし,ラ島数を増やし移植を試みた.1.膵臓全摘出による糖尿病犬の作成およびラ島の単離昨年度と同様に犬(体重15〜20Kg)を使用し,全身麻酔下で開腹した.十二指腸は温存し,膵臓全摘出術を施行.次に摘出した膵臓からラ島を単離した.保存液から膵臓を取り出し,膵管にHBSSで溶解したコラゲナーゼを注入し,膵臓を膨化させた.その後,膵臓を細切し,HBSS液で10分間37℃にてdigestionする.次に60分間程度冷温でdigestionを行う.最後にFicoll液で濃度勾配法を用いてラ島のみを単離した.ラ島はRPMI1640培地に入れ,5%CO_2,37℃の条件下で培養した.2.ラ島の移植膵臓全摘出し3〜4週後,糖尿病(血糖が300mg/dL以上)になった犬をrecipientとした.全身麻酔下で透視を用い犬の右鼠径部からRHカテーテルをセルディンガー法で挿入し,ガイドワイヤーを使用して選択的に肝動脈にRHカテーテルを挿入した.培養後,凍結保存していたラ島を溶解し,生理食塩水3ccに入れ,RHカテーテル内を通し肝臓内にラ島を移植した.ラ島数は300000〜400000islet equivalents(IEQ)とし,昨年度より数を増やし移植を試みた.しかし,移植の効果を認めるまでには至っておらず,今後さらに検討していく予定である.