上皮細胞分化を指標とした口腔癌遺伝子治療の有用性の検討

以上皮细胞分化为指标检验口腔癌基因治疗的有效性

• 批准号: 11771281
• 负责人: 福住 雅州
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11771281/
• 关键词: 口腔扁平上皮癌; 口腔粘膜培養細胞; サイトケラチン; グルコーストランスポーター; VHL; Egr-1; 口腔扁平上皮細胞株; RT-PCR; ヒト歯肉由来ケラチノサイト

正常口腔粘膜培養細胞および口腔扁平上皮癌(OSCC)細胞株における上皮系細胞特異的な中間系フィラメント、サイトケラチンの発現をRT-PCR法により検索した。サイトケラチン13(Cytokeratin、K13〉、K14、K18およびK19では、発現量に違いが認められたが、いずれも全てのアイソフォームを発現していた。単層培養という環境変化により、重層上皮組織における分化依存性アイソフォーム発現様式が破綻したか、サイトケラチン発現自体が生理的に細胞の形態・機能変化に伴い発現様式を変化させると考えられた。造血系細胞など上皮組織以外にもK19発現が誘導されることを考慮すると、遺伝子導入によるこれらのプロモーター依存的発現誘導は遺伝子治療に適しているとは云い難い。上皮系腫瘍の臨床的悪性度の指標として転移能や浸潤能、さらに血管新生能が挙げられる。固形癌における血管新生過程はエネルギー源供給という合目的性以外にも低酸素環境によるストレス抵抗性癌細胞のクローン化にも貢献していると考えられている。VEGFやGLUT1は低酸素誘導遺伝子群に分類されており、特にGLUT発現に関して転写因子遺伝子発現を加えてRT-PCRによる検索を行った。低酸素培養により、OSCC細胞株においてGLUT1発現亢進およびVHL発現増加に伴う経時的GLUT1発現低下が観察されたが、正常粘膜培養細胞で観察される一過性のEgr-1およびGLUT2発現亢進は認めなかった。高糖培養においては正常口腔粘膜培養細胞に認められるGLUT2発現誘導の糖濃度依存性が消失していた。癌細胞内は恒常性維持必須物質の動的・質的変化によるリン酸化や酸化還元状態の変動に伴い組織構築や遺伝子発現に異常を来すのであろう。口腔組織特異的な遺伝子発現誘導の解明には、口腔癌における低濃度培養におけるGLUT2発現亢進の機序を明らかにすることも必要であろう。

Normal oral mucosa culture cells and oral squamous cell carcinoma (OSCC) cell lines were detected by RT-PCR for the development of epithelial cell-specific intermediate lines. K13 (Cytokeratin, K13), K14, K18, K19, K18, K18, K19, K18, K19, K19, K18, K19, K19, K1 Layer culture and environment change, layer epithelial tissue differentiation dependence, cell development, defect, cell development, physiological change, cell morphology and function change, cell development, cell development, and cell differentiation. The expression of K19 in hematopoietic cells other than epithelial tissues is difficult to consider when induced by gene introduction and gene therapy. Clinical indicators of the severity of epithelial tumors include migration, infiltration, and angiogenesis. The angiogenesis process of solid cancer is not only the source of the tumor, but also the target of the tumor. VEGF and GLUT1 are related to the classification of low acid inducible gene groups, especially GLUT-induced gene expression, and RT-PCR-induced gene expression. The transient increase of Egr-1 and GLUT2 was observed in normal mucosa culture cells. GLUT2 induction and glucose concentration dependence disappeared when cultured in high glucose medium and normal oral mucosa cells. Changes in the state of acidification, changes in tissue architecture, and changes in the development of genes that are essential for the maintenance of constant activity in cancer cells Oral tissue-specific gene expression is induced by low concentration culture, and the mechanism of GLUT2 expression is necessary.

项目成果

Hamakawa H: "Keratin mRNA for detecting micrometastasis in cervical lymph nodes of oral cancer"Cancer Letters. 160(1). 115-23 (2000)

Hamakawa H：“用于检测口腔癌颈部淋巴结微转移的角蛋白 mRNA”《癌症快报》。

Fukuzumi M: "Gene expression of GLUT isoforms and VHL in oral squamous cell carcinoma"Cancer Letters. 161(2). 133-40 (2000)

Fukuzumi M：“口腔鳞状细胞癌中 GLUT 亚型和 VHL 的基因表达”癌症快报。