歯根形成期における成長因子の遺伝子発現と局在

牙根形成过程中生长因子的基因表达和定位

• 批准号: 11771366
• 负责人: 佐藤 慶伴
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11771366/
• 关键词: 歯根形成; BMP; 歯周組織; マラッセの上皮遺残; 歯根形成期; BMP receptor

【緒言】Bone morphogenetic protein(BMP)は骨形成に関与するだけでなく,歯の形態形成においても,上皮-間葉相互作用におけるシグナル伝達物質として細胞の分化や細胞外マトリックス(ECM)の合成を調節していると考えられている。そこで本研究では,ラット歯根形成期におけるBMP-2,BMP receptor(BMPR)および歯根膜のmarkerであるType XII Collagen(Col-XII)の局在を免疫組織化学を用い検索した。【材料および方法】1.実験動物は生後1〜6週のWistar系雄性ラット24匹を用いた。4%パラフォルムアルデヒドで潅流固定後,上下顎臼歯部を取り出し,0.1M EDTA溶液で脱灰を行った後,脱水して約5μmのパラフィン切片とした。2.免疫組織化学:1)使用した抗体(1)BMP:抗ヒトBMP-2抗体(2)Col-XII抗体(3)BMPR:BMP type IA,IB,II receptor抗体。2)免疫反応:ABC法で反応を行い,光顕下で免疫反応の局在を観察した。【結果】BMP-2の免疫反応は,歯根形成初期では,歯槽頂の骨芽細胞,マラッセの上皮遺残にみられた。歯根膜の線維芽細胞では歯間水平線維群に近接した線維芽細胞に最も強い免疫反応が観察された。歯根形成後期および根尖形成期では,根間分岐部付近のマラッセの上皮遺残が強い免疫反応を示した。Col-XIIの免疫反応は,根尖形成期より歯間水平線維群に近接した線維芽細胞に強く観察された。BMPRにおける観察では,BMPR-IA,-IB,-IIの免疫反応は歯槽骨の骨芽細胞,破骨細胞,マラッセの上皮遺残および歯間水平線維群に近接した線維芽細胞に観察された。しかし,各抗体間の反応の強さには差が認められ,骨芽細胞およびマラッセの上皮遺残ではBMPR-IBおよび-IIの反応はBMPR-IAと比較して強かった。【考察および結論】歯根形成期においてBMP-2,BMPRおよびCol-XIIが歯間水平線維群に近接した線維芽細胞にcolocalizeしていることからBMPは歯根膜のmarkerであるCol-XIIの合成に重要な役割を果たすものと考えられた。そのため,BMP-2は歯根象牙質や歯周組織の硬組織だけでなく歯根膜などの軟組織の形成にも関与していることが示唆された。また,マラッセの上皮遺残にはBMP-2およびBMPRが局在していたことから,マラッセの上皮遺残は歯根膜組織の形成において上皮-間葉のシグナル伝達に関係している可能性が示唆された。

Bone morphogenetic protein(BMP) is involved in bone formation, tooth morphogenesis, epithelial-mesenchymal interactions, cellular differentiation, and extracellular synthesis. In this study, BMP-2,BMP receptor(BMPR) and marker of Type XII Collagen(Col-XII) were detected by immunohistochemistry during root formation. [Materials and Methods] 1. Wistar male rats 1 ~ 6 weeks after birth were used. After the 4% aqueous solution was fixed, the upper and lower jaw teeth were taken out. After 0.1M EDTA solution was deashed, the water was removed to about 5μm. 2. Immunohistochemistry:1) Use of antibodies (1)BMP: anti-BMP-2 antibody (2)Col-XII antibody (3)BMPR:BMP type IA,IB,II receptor antibody. 2)Immune reaction:ABC method is in the middle of the reaction, and the immune reaction is in the middle of the reaction. [Results] BMP-2 immune response was reversed in the early stage of tooth root formation, bone bud cells at the top of tooth groove, and epithelial remnants of tooth root formation. The most powerful immune response is observed in the root membrane of the vascular cells, which are close to the horizontal vascular groups. During the late period of root formation and root tip formation, the differentiation between roots was closely related to the epithelial residue and the immune response was strong. Col-XII immune response, root tip formation stage, horizontal line groups, close to the line of vascular bud cells are strongly observed. BMPR is observed in vitro, and BMPR-IA,-IB,-II immune responses are observed in vitro in vitro. In addition, there is a strong difference between the antibodies and the BMPR-IA antibodies in the epithelial remains of bone bud cells. [Investigation and Conclusion] BMP-2,BMPR and Col-XII are important markers for the formation of dental roots. BMP-2 is an indicator of the relationship between dentin and peridental hard tissue formation and soft tissue formation. The possibility that BMP-2 and BMPR may be involved in the formation of epithelial-mesenchymal root membrane tissue in the epithelial remnant of the root canal is suggested.