ラット肝細胞及び肝ミクロソームのエストロゲン代謝に対する環境化学物質の影響

环境化学物质对大鼠肝细胞和肝微粒体雌激素代谢的影响

• 批准号: 11771484
• 负责人: 神野 透人
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: National Institute of Health Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11771484/
• 关键词: ラット肝細胞; 肝ミクロソーム; 薬物代謝酵素; シトクロムP450; 内分泌撹乱化学物質; エストロゲン; 内分泌攪乱化学物質

本研究では、エストロゲン代謝に影響を及ぼす可能性のある環境化学物質として1,4-Dioxaneに着目し、Matrigel上で培養したラット肝細胞を用いて1,4-Dioxaneによる肝薬物代謝酵素の誘導について検討を行った。32mMの1,4-Dioxaneを48時間曝露したラット肝細胞ではMethoxyresorufin O-demethylase活性、Ethoxyresorufin O-deethylase活性、Penthoxyresorufin O-depentylase活性およびBenzyloxyresorufin O-debenzylase活性がそれぞれ未処理肝細胞の2.6倍、2.2倍、8.9倍、24倍に増加することが明らかになり、1,4-DioxaneによるCYP2B1/2の誘導を示唆する結果が得られた。また、Testosterone(TS)の位置特異的な水酸化活性を測定した結果でも、TS2α-OH活性で1.9倍、TS6β-OH活性で1.4倍、TS16α-OH活性で3.0倍、TS16β-OH活性では6.4倍の増加が観察され、1,4-DioxaneがCYP2B1/2依存性の酵素活性を増加させることが明らかになった。さらに、各シトクロムP450分子種に特異的な抗体を用いたWestern BlotおよびCompetitive RT-PCR法によるmRNAの定量結果からも1,4-DioxaneがCYP2B1/2を誘導することが確認された。昨年度の研究で、非イオン性界面活性剤の生分解物である4-tert-Octylphenolおよびその塩素化体がCYP2B1/2を誘導することを明らかにした。1,4-Dioxaneは非イオン性界面活性剤の製造過程でエチレンオキサイド鎖を付加する際の副反応により生成することが知られており、非イオン性界面活性剤の水環境汚染により複合的なCYP2B1/2の誘導が引き起こされる可能性を示唆する結果が得られた。

In this study, environmental chemicals and environmental chemicals were used in this study. Dioxane was used to study the effects of hepatocytes on Matrigel. Dioxane was used to induce liver cancer by using enzymes instead of enzymes. The Methoxyresorufin O-demethylase activity, Ethoxyresorufin O-deethylase activity, Penthoxyresorufin O-depentylase activity and Benzyloxyresorufin O-debenzylase activity of the untreated liver cells were 2.6,2.2,8.9,24 times higher than those of the untreated liver cells after 48 hours of 32mM exposure. The results showed that the results were satisfactory. The results of water acidification activity test, TS2 α-OH activity, TS6β-OH activity, TS16 α-OH activity, TS16β-OH activity, CYP2B1/2-dependent enzyme activity, CYP2B1/2-dependent enzyme activity and CYP2B1/2-dependent enzyme activity were 1.9times, 1.9times, 1.4times, 3.0times and 6.4times respectively. The specific antibodies of P450 molecules were detected by Western Blot assay and Competitive RT-PCR method. The results showed that the quantitative results were as follows: (1) the quantitative results showed that the specific antibodies of P450 molecules were detected by Elisa, and the specific antibodies of P450 molecules were detected by Competitive RT-PCR method. Last year's study, non-reactive interfacial activity, biodegradable products, 4-tert-Octylphenol compounds, homogenized bodies, CYP2B1/2 molecules, and biodegradable compounds were analyzed. (1) during the process of production of non-invasive interface activity, the production process of non-invasive interfacial activity of Dioxane is sensitive to the production of environmental information, and the CYP2B1/2 guidance of non-invasive interfacial activity in the water environment leads to the possibility of instigating the effect of environmental pollution.