放射性ストロンチウムの取り込みに関与する遺伝子の同定と解析
放射性锶吸收相关基因的鉴定和分析
基本信息
- 批准号:11780408
- 负责人:
- 金额:$ 1.28万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:1999
- 资助国家:日本
- 起止时间:1999 至 2000
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究は、酵母におけるSr取り込みに関与する物質の遺伝子レベルでの同定および解析を目指したものである。昨年度は、ストロンチウム取り込みに関与する分子に変異をきたした変異株の取得を目的とし、抗生物質ブラストサイジンSに対する耐性遺伝子BSDを挿入遺伝子に用いたrestriction enzyme-mediated integration法(REMI)により、Schizosaccaromyces pombeの形質転換体約700株を作成した。今年度は、これらの変異体から、マルチトレーサー法およびICP-MS法により、ストロンチウムの取り込み量が野生株の約1/2である6株を選別した。これらの株は、ストロンチウムのみならずBe、Mn、Co、ZnおよびRbの取り込み量も低かったことから、破壊された遺伝子はストロンチウムの取り込みに特異的なものではないことが示唆された。これらの株のゲノムを用いたPCRの結果、四株で一カ所以上、二株で二カ所上、外来遺伝子がゲノムに挿入されている可能性が示された。一方、昨年見いだしたZrおよびScの取り込み量が高い株について、核種取り込み能をマルチトレーサー法によりさらに精査した。3%グルコース存在下において、この変異株のSc、Se、RbおよびZrの取り込み量は野生株より高い値を示した。興味深いことに、野生株および変異体両方におけるこれらの元素の取り込み量をグルコースの有無により比較したとき、Sc、SeおよびZrの取り込み量はグルコース非存在下の方が存在下より高い値を示した。これらのことから、グルコース依存性の何らかの機構の欠損が、変異株におけるこれらの取り込み量の上昇の要因の一つの可能性として考えられる。また、X線分析顕微鏡で調べた結果、この変異株のカリウムおよびリンの含有量は野生株より高いことが示された。サザンハイブリダイゼーション解析から、この変異株のゲノムには二カ所以上変異が生じていることが示唆された。今後、これらの変異体の遺伝子レベルでの解析が進むことを期待したい。
This study is aimed at the identification and analysis of yeasts and related substances. About 700 mutant strains of Schizosaccaromyces pombe were produced last year by restriction enzyme-mediated integration (REMI) method for the isolation of BSD, a resistant strain to antibiotics. This year, the number of wild plants selected by ICP-MS method is about 1/2. In this case, the content of Be, Mn, Co, Zn and Rb is low, and the content of Rb is low. The PCR results showed that four plants were in the top, two plants were in the top, and exotic plants were in the middle. A party, last year to see the middle of the Zr Sc In the presence of 3% of the species, Sc, Se, Rb and Zr are selected from the wild species. In the wild, in the wild. The probability of the increase in the amount of energy required by the mechanism is examined. X-ray analysis and microscopic results show that the content of these mutant plants is higher than that of wild plants. The two sides of the border are divided into two parts. In the future, we will continue to look forward to the analysis of the differences between the two countries.
项目成果
期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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上園 保仁
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