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内因性阻害物質を分子プローブとした活性型フェノールオキシダーゼの機能構造解析

使用内源抑制剂作为分子探针的活性酚氧化酶的功能结构分析

基本信息

批准号：
12760078
负责人：
佐藤孝
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Saga University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

イエバエ蛹より単離されたフェノールオキシダーゼインヒビター(POI)は、昆虫の変態・生体防御に深く関わると考えられるフェノールオキシダーゼに対する非常に強力な内因性阻害ペプチドである。本研究においては、強い自己酸化活性を有する事からその活性型酵素の単離精製が困難であるため、蛋白質レベルでの研究が遅れている活性型フェノールオキシダーゼについて、POIを多機能プローブとして用いる事によりその詳細な知見を得る事を目的として行なった。まず、POIをプローブとして作成したアフィニティーカラムにより、新たなフェノールオキシダーゼ様活性を有する蛋白質複合体の存在を見出した。本複合体は、幼虫から蛹への形態変化に沿って発現し、その活性の発現にはカルシウム等の二価イオンの存在が必須であり、これまでに単離精製されているフェノールオキシダーゼとは性質が大きく異なっていた[投稿準備中]。現在その構造を決定中である。また、本酵素を阻害する蛋白質として新たにペプチド性のPOIとは異なる約20kDaの蛋白質を新たに見出し、これが分子単体としての阻害強度はPOIに若干劣るが、イエバエ蛹抽出液に占めるフェノールオキシダーゼ阻害活性の主要な成分の一つである事を見出した[投稿中]。これらの結果は、少なくともイエバエにおけるフェノールオキシダーゼ及びその活性制御が、フェノールオキシダーゼとPOIよる一次元的な物ではなく、これまで知られていない複数の蛋白質が複雑に相互作用し行われている事を示唆している。

The pupae were isolated from the pupa, and the pupae were isolated from each other. The insects were killed in the POI, and the insects were used to prevent the growth of the organism. The purpose of this study is to improve the acidizing activity of your own acidizing system. In this study, you need to improve your acidizing activity. In this study, you can use your own acidizing activity to improve your acidizing activity. In this study, you can use your own acidizing activity to improve your acidizing activity. In this study, you can use your own acidizing activity to improve your acidizing activity. There is a protein complex in which there is a protein complex. In this paper, the results are as follows: POI, protein, protein, protein and protein. The combination of the body, the larva, the pupa, the shape of the body, the larva, the larvae, the larvae, the larvae and the larvae. We are now in the process of making a decision. This enzyme inhibits the activity of POI protein and 20kDa protein. The molecular strength of the protein is not as good as that of POI. The pupa extract accounts for more than one of the main components of the protein. In terms of the results, the results, the data, the results, the results, the results and the results.