出芽酵母を用いたヒトDNAヘリカーゼ異常症の遺伝子診断法の開発

利用酿酒酵母开发人类 DNA 解旋酶疾病的遗传诊断方法

• 批准号: 12770069
• 负责人: 鈴木 貴夫
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770069/
• 关键词: WRN; BLM; ヘリカーゼ; 遺伝子診断; 出芽酵母; RTS; ストップコドンアッセイ法; 酵母

出芽酵母を用いたストップコドンアッセイ法*平成13年度新規に行った実験計画としては、ヒト臨床サンプル(末梢血単核球)よりの出芽酵母を用いた遺伝子診断をWRN遺伝子、BLM遺伝子に関してのクオリティーのチェックを行った。特にWRN遺伝子について、ヒト末梢血単核球からの診断に必要な充分量のcDNAが得られず計画は暗礁に乗り上げた。*この原因として、もともとWRN遺伝子の発現が末梢血単核球で極端に弱いこと.あるいはWRNmRNA自体の安定性の問題も考えられた。これに対する対処方法として、PCR法を用いてenrichするか、あるいは、患者さんよりの検体で、発現の高い臓器を選んで解析を行うなどの解決策を現在検討中である。出芽酵母を用いた機能的診断法*平成12年度に引き続きWRN遺伝子とBLM遺伝子のミスセンス変異の作製を行った。WRN遺伝子については、現在までに発病に関連があると思われるミスセンス変異はC末端の1例が報告されているに過ぎない。またBLM遺伝子については全疾思関連遺伝子の約3割がミスセンス変異であると言われており、その一部の作製に成功した。*酵母sgsl変異株への野生型と変異型のWRN遺伝子、8LM遺伝子、RTS遺伝子の導入実験により出芽酵母を用いた機能的遺伝子診断法の開発においては、一部、機能的変化をもたらした見えるフェノタイプを示したクローンも得られたが、今のところ、解析段階であり臨床応用には至っていない。また本研究費より得られた研究成果の一部を次項の論文として発表を行った。今後、更なる解析をすすめ出来るだけ早くの臨床応用を目指し鋭意研究中である。

Saccharomyces cerevisiae was used to cut off WRN spores and BLM spores by using the new rules of Pingcheng in the year 13. Special WRN, peripheral blood, nuclear globule, nuclear globule, nuclear glob * the cause, the WRN, the peripheral blood nuclear globule, the peripheral blood nuclear This is the first time to ask WRNmRNA self-stability questions. In the PCR method, we used the enrich method, the patient's body, the patient's body, the height of the device, the resolution of the decision and the decision in the computer. Saccharomyces cerevisiae can be cut off by using the method of mechanical energy. In Pingcheng 12, the WRN yeast was introduced into the market in the first half of the year, and the BLM seed was used to make the production line. WRN is currently suffering from medical problems. There is one case at the C end of the report that has been reported. Please BLM your son and make a successful movie about 3 times later. * yeast sgsl strain, wild type, wild type, WRN, 8LM, and RTS spores were introduced into the yeast cell, and the budding yeast was introduced into the yeast cell. The machine was used to open the yeast cell, and the one that could be used was used to show that the temperature was successful. Now, the analytical section is used in the laboratory. In this study, I have obtained the results of this study. I have obtained a table of the results of this study. In the future, we will use the eyes to indicate that we are in the process of studying.

项目成果

Hideaki Kato, Shunsuke Kato, Takao Suzuki, Chikashi Ishioka: "Functional Evaluation of p53 and PTEN Gene Mutations in Gliomas."Clinical Cancer Research. 6. 3937-3943 (2000)

Hideaki Kato、Shunsuke Kato、Takao Suzuki、Chikashi Ishioka：“神经胶质瘤中 p53 和 PTEN 基因突变的功能评估”。临床癌症研究。

Kato H,Kato S,Han SH,Suzuki T et al.: "Functional evaluation of p53 and pTEN Gene Mutations in Gliomas."Clinical Cancer Research. 6. 3937-3943 (2000)

Kato H、Kato S、Han SH、Suzuki T 等人：“神经胶质瘤中 p53 和 pTEN 基因突变的功能评估”。临床癌症研究。

Han SH,Kato H,Kato S,Suzuki T et al.: "Functional evaluation of pTEN missense mutations using in vitro phosinositide phosphatase assay."Cancer Research. 60. 3147-3151 (2000)

Han SH、Kato H、Kato S、Suzuki T 等人：“使用体外磷酸肌醇磷酸酶测定对 pTEN 错义突变进行功能评估。”癌症研究。

Shnang-Yin Han, Hideki Kato, Takao Suzuki, Chikashi Ishioka: "Functional Evaluation of PTEN missense Mutations using in vitro Phosphoinositide phosphate assay."Cancer Research. 60. 3147-3151 (2000)

Shnang-Yin Han、Hideki Kato、Takao Suzuki、Chikashi Ishioka：“使用体外磷酸肌醇磷酸测定法对 PTEN 错义突变进行功能评估。”癌症研究。