权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

低容量超音波による血管内皮細胞への情報伝達

通过低容量超声将信息传输至血管内皮细胞

基本信息

批准号：
12770336
负责人：
西條芳文
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は、組織に温度上昇やキャビテーションなどによる障害を与えない程度の低容最の超音波を照射し、血管内皮細胞へ情報伝達を行うことが可能かどうかについて検討することである。直径3cm厚み5mmのPZT平面振動子を直径35mm高さ1cmの円盤状のシャーレ中心に取り付け、インキュベータ中に設置可能なサイズの小型超音波照射装置を作製した。外部の超音波発生装置(ファンクション・ジェネレータ)にて周波数、超音波強度をコントロールし、超音波照射装置に信号を入力した。ウシ大動脈血管内皮細胞(Bovine Aortic Endothelium Cell:以下BAEC)を使用して実験を行った。35mmのディッシュにDulbecco's Modified Eagle's medium(DMEM)と10%ウシ胎児血清を加え、CO2濃度5%、温度37?に設定されたインキュベータ内にてBAECをconfluentな状態になるまで培養した。BAECをPhosphate Buffered Saline(PBS)で2回洗浄した後、カルシウムイオンに対する蛍光色素であるCa gree-1(2μM)を加えて室温で30分間細胞内に取り込ませた。細胞内に取り込まれなかった蛍光色素を洗浄し、DMEM4mlを加えたものをコントロール群と超音波照射群にわけて観察を行った。超音波照射群に対しては周波数1MHzの微弱超音波をディッシュの下方より照射し、蛍光顕微鏡にて経時的な細胞内カルシウムイオン濃度の変化を3分間にわたって観察した。超音波照射群では照射開始直後に約10%の一過性の蛍光強度の上昇が観察され、コントロール群ではこのような上昇は観察されなかった。これは微弱超音波がメカニカルな刺激となり、細胞内でのカルシウムイオン濃度を上昇させたためと考えられた。

The purpose of this study is to investigate the possibility of tissue temperature rise, damage, and degree of hypovolumic ultrasound irradiation and vascular endothelial cell information transmission. PZT planar vibrator with diameter of 3cm and thickness of 5mm is manufactured by a small ultrasonic irradiation device with diameter of 35mm and height of 1cm in the shape of a disk. The frequency, intensity, and signal input of the external ultrasonic generator Bovine Aortic Endothelia Cell (BAEC) is used in the development of vascular endothelial cells. Dulbecco's Modified Eagle's medium(DMEM): 35mm, 10%, 5% CO2, 37 ℃Set up the BAEC confluent status in the media. BAEC Phosphate Buffered Saline(PBS) after 2 wash, the light pigment Ca green-1(2μM) was added to room temperature for 30 minutes. The cells were irradiated with DMEM4ml, and the cells were irradiated with ultrasound. The changes in intracellular concentrations of 1MHz weak ultrasound at the frequency of 1MHz were observed in 3 minutes after irradiation with a microscope. A transient increase of about 10% in the intensity of the light immediately after the start of the ultrasonic irradiation was observed. The weak ultrasound waves stimulate the growth of the cells.