腎尿細管クエン酸輸送体NaDC-1の尿路結石生成への影響の検討

肾小管柠檬酸转运蛋白NaDC-1对尿路结石形成的影响研究

• 批准号: 12770855
• 负责人: 有賀 誠司
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770855/
• 关键词: renal proximal tubule; kidney stone; citrate transport; NaDC-1; metabolic acidosis; 尿路結石; 低フエン酸尿症

研究1.外来にて再発性尿路結石患者に対し尿中クエン酸排泄を測定し(測定はSRL社に依頼した)、クエン酸排泄量が200mg/day以下の患者の中から遠位尿細管性アシドーシス、低カリウム血症、過食塩摂取患者を除外し、特発性低クエン酸尿症と思われる症例より血液を採取し、白血球DNAを抽出した。Genomic geneの腎尿細管クエン酸トランスポーター、NaDC-1のexonのみPCRにて増幅したのちdirect sequenceを行い(サワデーテクノロジーに依頼)遺伝子配列を検討した結果、exon 12に遺伝子異常(A→G)を見いだした。これらの遺伝子変異により共にアミノ酸の変異も生じることが判明した。再発性尿路結石患者においてこの遺伝子異常と尿中クエン酸排泄量とのあいだにどのような関係があるか現在検討中である。またmutagenesis kitによりNaDC-1 mutated DNAを作成した。これをアフリカツメガエルの卵に発現させ,(^<14>C)Citrateの取り込みをwild type DNAを発現させたものと比較検討してみる。研究2.低クエン酸尿症を呈するラットが実際に腎結石を形成するか否かを調べるために、酸を慢性負荷により低クエン酸尿症ラットのモデルを作製しVitamin D_3を投与することにより腎結石に生成の有無を検討した。酸負荷+Vitamin D3を投与したラットにおいては低クエン酸尿を呈し腎結石の生成が観察された。一方、Vitamin D_3のみ投与したラットでは結石の生成は見られなかった。Northem blotによる解析で酸負荷による低クエン酸尿結石形成ラツトではVitamm D_3のみ投与したラット、コントロールラットに比べて腎NaDC-1,オステオボンチンmRNAの発現の増加が観察された。現在Vitamin D製剤は骨粗鬆症の治療に頻用されており副作用として尿路結石生成があるが、Vitamm D投与時の結石促進因子、抑制因子についての検討についての報告は多くなされていない。この研究により、骨粗鬆症でVitamin D_3投与を受けている症例においては、酸負荷となるような食事は低クエン酸尿症を呈し、腎結石の生成を促進する可能性があることが示唆された。この研究成果は2001年アメリカ腎臓学会にて発表した。

Study 1. Foreign に て 発 sex again in patients with urinary stones に し seaborne urine ク エ ン determination of acid excretion を し (determination of は SRL club に 頼 し た), ク エ ン acid excretion が below 200 mg/day in patients with の の か ら as a thin tube urine sex ア シ ド ー シ ス, low カ リ ウ ム hematic disease, overeating, salt, take patients except を し, 発 sex low ク エ ン acid urine と think わ れ In cases of る syndrome, よ <s:1> blood を is taken, <s:1> white blood cell DNAを is extracted, and た た. Genomic gene の renal tubule urine ク エ ン acid ト ラ ン ス ポ ー タ ー, NaDC - 1 の exon の み PCR に て rights of し た の ち direct sequence line を い (サ ワ デ ー テ ク ノ ロ ジ ー に in 頼) heritage 伝 with sequence を beg し 検, exon た results 12に sub-anomaly 伝 (A→G)を see だ だ た. The cultural heritage of <s:1> れら 伝 seed transformation によ <e:1> にア にア acid ノ transformation students じる とが とが identification of た. 発 sex again in patients with urinary stones に お い て こ の heritage 伝 child abnormal と urine ク エ ン acid excretion と の あ い だ に ど の よ う な masato is が あ る か now 検 please で あ る. Youdaoplaceholder0 mutagenesis kitによ によ NaDC-1 mutated DNAを to make た た. こ れ を ア フ リ カ ツ メ ガ エ ル の eggs に 発 now さ せ, (^) < > 14 C Citrate の take り 込 み を wild type DNA を 発 now さ せ た も の と compare beg し 検 て み る. Research 2. Low ク エ ン acid urine を show す る ラ ッ ト が be interstate に stones を forming す る か no か を adjustable べ る た め に, acid を chronic load に よ り low ク エ ン acid urine ラ ッ ト の モ デ ル を cropping し Vitamin D_3 を cast with す る こ と に よ り kidney stones に generated の presence of を beg し 検 た. Acid load +Vitamin D3を administration with <s:1> たラットにお て て <s:1> low <s:1> エ <s:1> aciduria を causes が観 kidney stone formation が観 examination された. One party, Vitamin D_3 <s:1> み is given to たラットで たラットで the formation of stones is seen in られな った った. Northem blot に よ る parsing で acid load に よ る low ク エ ン acid urinary stone formation ラ ツ ト で は Vitamm D_3 の み cast with し た ラ ッ ト, コ ン ト ロ ー ル ラ ッ ト に than べ て renal NaDC - 1, オ ス テ オ ボ ン チ ン mRNA の 発 now の raised が 観 examine さ れ た. Now Vitamin D system tonic は thick loose bone disease treatment の に frequency with さ れ て お り side-effects と し て urinary stones to generate が あ る が, Vitamm D の calculi when VCS and promoting factor, inhibiting factor に つ い て の beg に 検 つ い て は の report more く な さ れ て い な い. こ の research に よ り, bone thick pine で Vitamin D_3 cast with を by け て い る cases に お い て は, acid load と な る よ う は な food low ク エ ン acid urine を し, kidney stones の generation を promote す る possibility が あ る こ と が in stopping さ れ た. The research results of アメリカ in 2001, the アメリカ nephrology society にて published a report on た.

项目成果

Seiji Aruga, Shigeo Horie, Tadaichi Kitamura: "Acid Ingestion Promotes Stone Formation in Rat Kidney"J Am Soc Nephrology. 12. T1-0015 (2001)

Seiji Aruga、Shigeo Horie、Tadaichi Kitamura：“酸摄入促进大鼠肾脏结石形成”J Am Soc Nephrology。