前立腺癌における接着分子インテグリンα9の発現と骨転移との関連性

粘附分子整合素α9在前列腺癌中的表达及其与骨转移的关系

• 批准号: 12770881
• 负责人: 三木 健太
• 金额: $ 0.32万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770881/
• 关键词: 前立腺癌; 骨転移; インテグリンα9

【背景・経緯】細胞表面に存在する接着分子インテグリンα9(以下α9)が骨組織に多く含まれるオステオポンチンをリガンドとし、またコラーゲンのフラグメントとの接着性も報告されている。これらの効果が前立腺癌骨転移において果たす役割の解明が求められる。【目的】前立腺癌骨転移におけるα9の効果を明らかにする。【方法】臨床組織および細胞株を用いた免疫組織化学によるα9蛋白質発現の確認を施行した。対象として前立腺癌30例、肥大症30例、および正常前立腺5例、また細胞株としてPC-3を用いた。同様の細胞株を用いたRT-PCR法によるα9mRNA発現の確認を施行した。【結果】免疫組織化学的検討の準備としてα9の細胞外ドメインに対する抗ウサギポリクローナル抗体と陽性コントロールの標本を作製し、臨床標本を収集して免疫染色での評価の準備を施行した。これらを用いて免疫染色の条件設定を施行した。固定法、包理法、抗体濃度、染色時間を変えて陽性コントロールで安定した染色性を得た。同様の条件で臨床標本で評価したところ29例(44.6%)において陽性染色を示し、21例(32.3%)においては細胞膜に強い染色性を示した。前立腺癌細胞株でのα9は蛋白質、mRNAのいずれも評価したPC-3では確認できなかった。【考察】α9の発現が細胞株では見られなかったが、組織においては半数近くの症例で陽性染色を示した。しかし、癌や肥大症などの疾患の存在との相関は不明であり、さらに検討標本数を増やして検討する必要がある。また、さらに他の前立腺細胞株での発現性を確認し、そのうちα9陽性細胞を今後の検討に用いる。すなわち、免疫沈降による骨基質蛋白質とα9の親和性の評価や、これらリガンドとの接着に伴う細胞運動性、蛋白分解酵素分泌の変化、シグナル伝達の活性化の評価を計画している。さらなる本研究の続行が求められる。

[Background] The presence of adhesion molecules on the surface of cells is reported in bone tissue. The results of this study are as follows: [Objective] Anterior adenocarcinoma bone metastasis α9 and its effects [Methods] Immunohistochemistry was used to confirm α9 protein expression in clinical tissues and cell lines. 30 cases of prostate cancer, 30 cases of hypertrophy, 5 cases of normal prostate, and PC-3 cells were used.α9mRNA expression was confirmed by RT-PCR in the same cell lines. [Results] Immunohistochemical preparations for the study of α9 extracellular proteins were carried out for the preparation of anti-tumor antibodies and positive lymphocytes, and for the collection of clinical lymphocytes and immunostaining preparations. The conditions for immunostaining were set. Fixation method, inclusion method, antibody concentration, staining time, and stability 29 cases (44.6%) showed positive staining, 21 cases (32.3%) showed strong staining. The expression of α9 protein and mRNA in the former adenocarcinoma cell line PC-3 was confirmed. [Investigation] α9 was found in cell lines, tissues and nearly half of the cases were positive staining. The relationship between the presence of cancer and hypertrophy is unclear, and the number of patients is increasing. In addition, the development of other prostate cell lines was confirmed, and the α9-positive cells were used in future studies. Evaluation of affinity for bone matrix protein α9 in the context of immunoprecipitation and subsequent evaluation of cellular motility, proteolytic enzyme secretion, and activation of protein expression. This study is based on the results of the study.