"ずり応力"により移行上皮細胞内で発現の変化する遺伝子の検索

寻找因“剪切应力”而在移行上皮细胞中表达发生变化的基因

• 批准号: 12770882
• 负责人: 橋本 恭伸
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tokyo Women's Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770882/
• 关键词: ストレッチストレス; T24; カドヘリン; ずり応力; シェアストレス; 移行上皮細胞

今年度は、培養細胞上で培養液とともに、回転板を回転させることで、細胞に"ずり応力"shear stressを与える装置を利用し、shear stressが膀胱癌細胞T24に与える影響を調べた。今回も、T24では発現の認められないE-cadherin遺伝子の発現について検討した。回転板の回転速度によって、4群(shear stressが0、5、10、20dynes/cm2)に分けた。さらに、それぞれを、負荷への曝露時間によって3群(0、6、12時間)に分けた。それぞれについて、stretch stressと同様に、E-cadherin遺伝子のmRNAレベルの発現をNorthernblotで、また蛋白レベルの発現をWestern blotで解析した。その結果、mRNAレベルの発現は、shear stressが5ならびに10dynes/cm2で、12時間曝露した群にのみ認められた。また発現は5dynes/cm2の群で若干強かった。蛋白レベルでは、いずれの群も確認できる程のシグナルは得られなかった。現在、再現性を確認するため追試を行なっている。一方、前年度に検討したストレッチストレスに対するT24の遺伝子レベルでの反応については、現在、differential display法で、負荷によって新たに発現する、もしくは発現が著しく強まる遺伝子のスクリーニング中であり、まだ最終的な結果は得られていない。

Our は, cultivating と で on cell cultures of と も に, returning the planning board を planning さ せ る こ と で, cell に "ず り 応 force" shear stress を and え る device using を し, shear stress が T24 bladder cancer cell に and え る influence を adjustable べ た. This time, で, T24で, で, are currently claiming められな, められな, E-cadherin 's remnant 伝, に, に, て検, て検 are demanding た. Return 転 board <s:1> return 転 velocity によって, 4 groups (shear stressが0, 5, 10, 20dynes/cm2)に minutes けた. Youdaoplaceholder0, それぞれを, load へ <s:1> exposure time によって three groups (0, 6, 12 times)に minutes けた. そ れ ぞ れ に つ い て, stretch stress と with others に, E cadherin posthumous son 伝 の mRNA レ ベ ル の 発 now を Northernblot で, ま た protein レ ベ ル の 発 を now Western blot で parsing し た. そ の results, mRNA レ ベ ル の 発 は, shear stress が 5 な ら び に 10 dynes/cm2 で, 12 time exposure し た group に の み recognize め ら れ た. Youdaoplaceholder0 shows で 5dynes/cm2 <s:1> group で several strong った った. The protein レベ レベ で で で った and the <s:1> ずれ <s:1> <s:1> group <s:1> confirm that the で る る る process シグナ シグナ で られな is られな った った. Now, reproducibility を confirms that するため traces the を line なって る る. One party, before the year に beg し 検 た ス ト レ ッ チ ス ト レ ス に す seaborne る T24 の heritage 伝 son レ ベ ル で の anti 応 に つ い て は, now, differential で display method, load に よ っ て new た に 発 now す る, も し く は 発 が now the し く strong ま る posthumous son 伝 の ス ク リ ー ニ ン グ in で あ り, ま だ the result of the final な は ら れ て い な い.