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重水の抗腫瘍効果を応用した悪性グリオーマ治療法の開発に関する基礎的研究

利用重水抗肿瘤作用治疗恶性胶质瘤的基础研究进展

基本信息

批准号：
13877227
负责人：
山崎俊樹
金额：
$ 0.26万
依托单位：
Shimane Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

重水の抗腫瘍効果を応用した悪性グリオーマ治療法の開発のために基礎研究を行った。主な検討項目は、重水の悪性グリオーマ細胞に対する殺細胞作用、アポトーシス誘導作用ならびに細胞周期に及ぼす影響の確認である。実験材料及び方法は、マウス悪性グリオーマ細胞株(RSV-M glioma)を用い、in vitro実験系で解析した。RSV-M gliomaは、C3H/HeNマウス由来でラウス肉腫ウイルス誘発性の悪性グリオーマ細胞株である。in vitro系におけるRSV-M gliomaの継代培養は10%fetal calf serum含有完全培地を用い、マイコプラズマ陰性を常時確認した。また、4-8週齢の成熟C3H/HeNマウス大脳半球内へのRSV-M glioma細胞の生着性も確認した。抗腫瘍作用の評価は、トリパンブルー染色による生細胞カウント法とMTTアッセイ法を用いた。アポトーシス誘導作用は、DNA断片化、カスパーゼ3の活性化、細胞膜脂質の変化のそれぞれの有無で評価した。細胞周期への作用はFACS解析で評価した。実験結果として、重水は10%〜50%の濃度域内でRSV-M glioma細胞に対し、殺細胞作用ならびにアポトーシス誘導作用を示し、その至適濃度は30%であることが判明した。さらに、RSV-M glioma細胞の細胞周期に対してはG2-M期への集積作用を示すことが確認できた。本研究は悪性グリオーマ治療分野において世界に先駆けた内容であり、今回の研究成果は今後臨床応用に際し貢献できると思われる。

The anti-swelling effect of heavy water is based on the basic research on the use of anti-tumor therapy. Main research project: Confirmation of the cytocidal effect of heavy water on the cell cycle of heavy water, the induction of heavy water on the cell cycle, and the influence of water on the cell cycle. The materials and methods were used, the use of the MASAV-M glioma cell line (RSV-M glioma), and the analysis of the in vitro system. RSV-M glioma and C3H/HeN MAS are derived from the erythroblastoma cell line. The in vitro system RSV-M glioma is cultured in 10% fetal calf serum containing complete terpenoids, and the negative results are always confirmed. The growth and development of RSV-M glioma cells in the large hemisphere of the large hemisphere of C3H/HeN glioma cells were confirmed at 4-8 weeks. Evaluation of the anti-swelling effect, and the use of the Tonkin staining method and the MTT method. The presence or absence of アポトーシス induction, DNA fragmentation, activation of カスパーゼ3の, and modification of cell membrane lipids are evaluated. FACS analysis of the role of the cell cycle was evaluated. The result is RSV-M within the concentration range of 10% to 50% of heavy water. The glioma cells have been tested and the cytocidal effect has been shown. The inducing effect of cells has been shown to be 30%.さらに、RSV-M glioma cells' cell cycle に対してはG2-M phase へのintegration effect を showed すことがconfirmation できた. The purpose of this study is to identify the nature of the treatment and the world, to determine the content of the study, and to contribute to the future clinical application of the research results.