独自に開発したDNAチップを用いた発癌因子抵抗性評価および発癌予防法の開発

さまざまな発癌因子に対し、ヒトはそれぞれ異なった感受性や抵抗性を保有していると考えられる。口腔扁平上皮癌においては喫煙、飲酒が日本における2大発癌因子と考えられており、郭個人に対するリスク評価が発癌予防としても、啓発・指導資料としても非常に有用と期待される。本実験では市販されている高価な汎用DNAチップに対して、独自に作製した口腔領域専用DNAチップを用いた。本年度は昨年度使用した1,423種類のcDNAクローン搭載チップを改良し、2,127種類cDNAクローン搭載チップを作製・使用した。1)健常者:5対の喫煙群と非喫煙群から血液を採取しmRNAを抽出精製した。2)口腔白板症患者:3対の喫煙群と非喫煙群それぞれの血液と正常組織と前癌組織からmRNAを抽出精製した。3)口腔扁平上皮癌患者:5対の喫煙群と非喫煙群からそれぞれの血液と正常組織と癌組織からmRNAを抽出精製した。4)これらのサンプルについて独自開発口腔領域専用DNAチップで発現状態を検索した。結果1)健常者群の血液による比較では、喫煙者と非喫煙者の間で発現状態に有意差のある遺伝子を絞り込むことができなかった。2)口腔白板症患者の血液による比較では有意な相違を絞り込むことができなかったが、病変部組織による比較では8種類の発現減弱遺伝子と13種類の発現亢進遺伝子が見つかった。3)癌患者の血液による比較では明確な相違は特定できなかったが、組織を用いた比較では12種類の発現減弱遺伝子と22種類の発現亢進遺伝子が見つかった。

さまざまな発癌因子に対し、ヒトはそれぞれ異なった感受性や抵抗性を保有していると考えられる。口腔扁平上皮癌においては喫煙、飲酒が日本における2大発癌因子と考えられており、郭個人に対するリスク評価が発癌予防としても、啓発・指導資料としても非常に有用と期待される。本実験では市販されている高価な汎用DNAチップに対して、独自に作製した口腔領域専用DNAチップを用いた。本年度は昨年度使用した1,423種類のcDNAクローン搭載チップを改良し、2,127種類cDNAクローン搭載チップを作製・使用した。1)健常者:5対の喫煙群と非喫煙群から血液を採取しmRNAを抽出精製した。2)口腔白板症患者:3対の喫煙群と非喫煙群それぞれの血液と正常組織と前癌組織からmRNAを抽出精製した。3)口腔扁平上皮癌患者:5対の喫煙群と非喫煙群からそれぞれの血液と正常組織と癌組織からmRNAを抽出精製した。4)これらのサンプルについて独自開発口腔領域専用DNAチップで発現状態を検索した。結果1)健常者群の血液による比較では、喫煙者と非喫煙者の間で発現状態に有意差のある遺伝子を絞り込むことができなかった。2)口腔白板症患者の血液による比較では有意な相違を絞り込むことができなかったが、病変部組織による比較では8種類の発現減弱遺伝子と13種類の発現亢進遺伝子が見つかった。3)癌患者の血液による比較では明確な相違は特定できなかったが、組織を用いた比較では12種類の発現減弱遺伝子と22種類の発現亢進遺伝子が見つかった。