未分化腎間葉細胞内に存在する腎幹細胞の同定と特異マーカーの確立

未分化肾间质细胞中存在的肾干细胞的鉴定及特异性标志物的建立

• 批准号: 15659065
• 负责人: 長田 道夫
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659065/
• 关键词: 未分化腎間葉細胞; 腎幹細胞; 分化; 血管内皮細胞; VE-cadherin; vWF; MS7; 腎臓; 幹細胞

腎臓は、高度に分化した臓器で再生しないと考えられてきた。しかし、最近多臓器に、臓器特異的幹細胞が発見され、分化誘導が試みられている。本研究は、腎臓の前駆細胞あるいは腎幹細胞と考えられている、後腎未分化間葉細胞の性格を明らかにし、特異的マーカーを確立することである。まず、未分化後腎間葉細胞のクローン細胞株をSV40 T抗原トランスジェニックマウス胎児(E11.5)腎臓から樹立した(MS7細胞株)。MS7は、紡錘形で間葉細胞の形態を示し、RT-PCRでは、NCAM, WT1,vimentin, Flk1,Flt1,Tie2,podocalyxinの遺伝子発現を認めたことから、血管内皮細胞としての性格を持つことが分かった。しかし、他の血管内皮細胞のマーカーであるVEcadherinや、成熟度の高いマーカーであるvWF, CD31の発現は認めなかった。次に、本細胞が血管内皮細胞に分化するか否かについて、分化誘導実験を行った結果、細胞をconfluentな状態で培養すると、細胞周期は停止し、遺伝子レベルではVE-cadherin, vWFの発現を認めた。この現象は、Vecadherinでは、培養4日目に、vWFでは培養14日目にそれぞれ発現亢進を認めた。さらにvWFでは蛋白レベルの増加を認めたが、VEcadherinではこれを認めなかった。また、VEGF, FGF-2などの成長因子による刺激は、この分化誘導を促すという結果は得られなかった。Collagen I, IVをコーティングした培養条件でも、これらの遺伝子発現には変化を認めなかった。以上から、未分化腎間葉細胞(MS7)は、その遺伝子発現プロファイルから、血管内皮細胞に類似した形質を持つこと、培養条件によっては分化型マーカーの発現が蛋白レベルでも誘導されることが分かった。

Renal に, highly に differentiation, た, で organ regeneration, な, と examination, えられて, た. <s:1>, recent multiple organelles に, organ-specific stem cells が published され, differentiation induction が test みられて る る. Before this study は is crucial, kidney の 駆 cells あ る い は renal stem cells と exam え ら れ て い る, after kidney undifferentiated mesenchymal の character を Ming ら か に し, specific マ ー カ ー を establish す る こ と で あ る. ま ず, undifferentiated after renal mesenchymal の ク ロ ー ン cell lines を SV40 T antigen ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス tire where a routine (E11.5) renal か ら set し た (MS7 cell lines). MS7 は, spindle で mesenchymal の form を し, rt-pcr で は, NCAM, WT1, vimentin, Flk1, Flt1, Tie2, podocalyxin の posthumous son 伝 発 を now recognize め た こ と か ら, vascular endothelial cells と し て の character を hold つ こ と が points か っ た. し か し, he の endothelial cells の マ ー カ ー で あ る VEcadherin や, high maturity の い マ ー カ ー で あ る vWF, CD31 の 発 は now recognize め な か っ た. に, this cell が endothelial cells に す る か no か に つ い て, induced differentiation be 験 を line っ た results, cell を confluent な state で cultivate す る は stop し と, cell cycle, but 伝 レ ベ ル で は VE - cadherin, vWF の 発 を now recognize め た. こ の は, Vecadherin で は, training 4 mesh に, vWF で は cultivate 14 orders に そ れ ぞ れ 発 hyperthyroidism を now recognize め た. さ ら に vWF で は protein レ ベ ル の raised plus を recognize め た が, VEcadherin で は こ れ を recognize め な か っ た. ま た, VEGF, FGF - 2 な ど の growth factor に よ る stimulation は, こ の induction を promote す と い う results ら は れ な か っ た. Collagen I, IV を コ ー テ ィ ン グ し た culture conditions で も, こ れ ら の posthumous son 伝 発 now に は variations change を recognize め な か っ た. Above か ら, undifferentiated kidney mesenchymal (MS7) は, そ の posthumous son 伝 発 now プ ロ フ ァ イ ル か ら, vascular endothelial cells に similar し た character を hold つ こ と, culture conditions, に よ っ て は differentiated マ ー カ ー の 発 now が protein レ ベ ル で も induced さ れ る こ と が points か っ た.

项目成果

後腎間葉細胞から血管内皮細胞へのin vitroでの分化検討

后肾间充质细胞向血管内皮细胞的体外分化研究

• 发表时间: 2004
• 期刊: 発達腎研究会誌 12
• 作者: 臼井丈一