可逆性完全不死化心筋細胞株の樹立およびナノオーダー機能評価

可逆永生化心肌细胞系的建立及纳米级功能评价

• 批准号: 15659186
• 负责人: 清水 壽一郎
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659186/
• 关键词: 心筋組織; 心筋細胞; 再生医療; 細胞不死化; 筋線維; 六角格子構造; 筋節構造; 発達; 心筋細胞培養; 可逆的不死化; 収縮蛋白; 心筋線維六角格子; 心肥大・発達

近年、再生医工学・再生医療として心筋細胞移植および心筋組織移植を探る研究が活発に行われている。心筋細胞移植および心筋組織移植による機能回復を図る上で、自家移植がもっとも望ましいが、自己心筋の増殖は期待できず、骨髄など幹細胞からの心筋誘導、骨格筋筋芽細胞移植による心機能回復が試みられている。しかし臨床応用を考えた場合心筋細胞ソースの大量培養による増幅をはかる必要がある。この目的のため、新しい心筋細胞の増幅法として研究分担者の開発した細胞不死化システムを用い、SV40TAgによる心筋細胞への増殖能の付加に成功した。このシステムではSV40TAgを除去し細胞増殖を止めることが可能であり、臨床応用に際しても非常に有望である。本年度は、昨年度樹立したラット新生児培養心筋を不死化し確立した心筋株について、まず発現分子の特徴を解析した。これまでに確認した心筋型トロポニンの発現に加え、ナトリウム、カリウム、カルシウムなど興奮収縮連関に密接に関連するイオントランスポート蛋白、アクチン、ミオシン、トロポミオシン、タイティンなど筋節構造を形作る蛋白の発現も確認出来た。しかしながら、明らかな筋節構造の発達や、収縮など、発達した心筋としての特性を引き出すため伸展刺激の負荷などを行っているが、過度な伸展刺激などの負荷は、Angiotensinなどの刺激と同様、NF-ATを介した病的な心筋肥大を引き起こすとされている。本研究において不死化したような新生児心筋組織の未発達な筋節構造が、生体の筋節構造に発達するまでのメカニズムは未だ明らかにされていない部分が多く、今後の検討課題である。心筋の再生医療の実現には、十分な収縮能を持つ心筋細胞、心筋組織の確保が重要であり、コラーゲン包埋心筋組織およびIPPAM積層心筋細胞シートを生体内で発達させることを試みる。今後、細胞進展刺激、電気的刺激、成長過程のラット新生児の成長因子環境の整備などをより一層体系的に検討し、筋節構造の発達、収縮能の獲得、周辺の心筋細胞との電気的な接合を持ちうる細胞へ誘導するため、引き続き精力的な研究を進める必要がある。

In recent years, regenerative medicine, regenerative medicine and cardiac muscle cell transplantation have been explored. Heart tendon cell transplantation, heart tendon tissue transplantation, heart function recovery, self-transplantation, heart tendon proliferation expectation, bone marrow stem cell transplantation, heart tendon induction, bone tendon bud cell transplantation, heart function recovery test. For clinical applications, it is necessary to increase the amplitude of large quantities of cardiac muscle cells. The aim of this study was to develop a novel method for the proliferation of cardiac muscle cells. The method was successfully used to study the proliferation of cardiac muscle cells in SV40 TAg. This is the first time we've seen this. This year, we have established the characteristics of new generation of cultured heart muscle cells and established the characteristics of new generation of heart muscle cells This confirms the presence of protein, protein, protein. The development, contraction, and development of tendon structures in the open and closed areas lead to the loading of extensional stimuli, the loading of hyperextension stimuli, and the stimulation of angiotensin-mediated NF-AT. In this study, the undeveloped tendon structure of newborn heart muscle tissue and the development of tendon structure of living body were studied. The development of regenerative medicine in the heart is very important for the maintenance of heart muscle cells and heart muscle tissues, including embedded heart muscle tissues and IPPAM laminated heart muscle cells. In the future, it is necessary to further study the stimulation of cell development, the stimulation of electricity, the preparation of growth factor environment in the growth process, the development of tendon structure, the acquisition of contraction energy, the maintenance of cell induction and induction of energy in peripheral cardiac muscle cells.

项目成果

Doi Y: "Expontial fitting of postextrasystolic potentiation may underestimate the cardiac Ca^<2+> recirculation fraction : a theoretical analysis"Jpn J Physiol. 53(2). 89-96 (2003)

Doi Y：“期外收缩后增强的指数拟合可能会低估心脏 Ca^2 再循环分数：理论分析”Jpn J Physiol。

Yagi N: "Sarcomere-length dependence of lattice volume and radial mass transfer of myosin cross-bridges in rat papillary muscle."Pflugers Arch. (In press). (2004)

Yagi N：“大鼠乳头肌中肌球蛋白跨桥的晶格体积和径向质量传递对肌节长度的依赖性。”Pflugers Arch。

Normal Distribution of Ventricular Pressure-Volume Area (PVA) of Arrhythmic Beats under Atrial Fibrillation in Canine Heart.

犬心脏房颤下心律失常搏动的心室压力-容积面积 (PVA) 的正态分布。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Am J Physiol Heart Circ Physiol (印刷中)
• 作者: Yagi N;Yagi N;Mohri S
• 通讯作者: Mohri S

Arterial and left ventricular pressures illude transient alternans of contractility during postextrasystolic potentiation

动脉和左心室压力会导致期外收缩后增强过程中短暂的收缩性交替

• 发表时间: 2004
• 期刊: Jpn J Physiol. 54(4)
• 作者: Iribe G;Shimizu J;Mohri S;Syuu Y;Imaoka T;Kiyooka T;Araki J;Kanmura Y;Kajiya F;Suga H.
• 通讯作者: Suga H.

Sarcomere-length dependence of lattice volume and radial mass transfer of myosin cross-bridges in rat papillary muscle

大鼠乳头肌中肌球蛋白跨桥的晶格体积和径向质量传递的肌节长度依赖性

• 发表时间: 2004
• 期刊: Pflugers Arch 448・2
• 作者: Iribe G;Yagi N;Yagi N
• 通讯作者: Yagi N