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プラスチック製カラムチューブを用いた多用途二次元電気泳動法の開発と応用

多功能塑料柱管二维电泳方法的开发与应用

基本信息

批准号：
16651103
负责人：
梶原英之
金额：
$ 2.24万
依托单位：
National Institute of Agrobiological Sciences
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

プラスチックカラムチューブを用いて通常の二次元電気泳動以外の泳動、特に一次元目について等電点電気泳動以外の手法が可能か検討した。その結果、酢酸尿素電気泳動その他各種泳動法について対応可能であることが判明した。しかしながら、それら電気泳動自体の分離能にも起因するが、新しく応用した電気泳動法は等電点電気泳動に比べて分離能は劣っていた。そこで、プラスチックチューブ内で起きる電気浸透流やタンパク質の吸着にその一因があるのではないかと考えられた。チューブ内側をリン脂質膜によってコーディングしたものを用いて泳動を試みたが、若干のテーリングの減少などは見られたものの、際だった改善は認められなかった。一方で、非変性状態でタンパク質の分離を試みるという考え方を発展させ、非変性状態で二次元クロマトグラフィーによるタンパク質の分離を試みた。分離はイオン交換法とゲル濾過の組み合わせによって行ったが、ここで分離されたタンパク質は飛行時間型質量分析装置で確認することができた。しかし、従来の方法では一度、質量分析装置に供したものはさらなる解析、例えばトリプシン分解などができなかった。そこで、質量分析装置にアプライしたサンプルをターゲット上でトリプシン分解する方法について検討した。短時間のトリプシン分解については、温度管理と湿度の管理が重要であり、さらに一定の有機溶媒と非イオン性界面活性剤の添加が有効であることがわかった。このオンターゲットでタンパク質処理する方法は報告例が少なく、このためのターゲット上で各種処理を行うのに適した装置は開発されていなかったので、その装置を考案し、実用新案として登録した。また、処理方法についても論文として発表した。

In general, other than second-dimensional swimming activities, special primary swimming activities and other electric point swimming activities may be difficult to use. The result of the experiment, the urea oxalate swimming exercise, the swimming exercise, the swimming method, the swimming method and the swimming method. The self-separation of electric swimming is much worse than that of other electronic swimming activities, such as the automatic separation of electric swimming, the automatic separation of electric swimming, and the use of the automatic separation method of electronic swimming, and so on. In the hospital, there is an increase in the amount of gas and electricity in the hospital. In the domestic market, the fat film is used to improve the quality of the lipid membrane, and there are several problems in the development of the lipid membrane. On the one hand, the non-sexual status is separated from each other, and the non-sexual status is divided into two parts: one side, the other side, the non-specific status unit, the non-specific status unit, the secondary unit, and the secondary unit. The separation and exchange method has been used to verify that the time-based quantity analysis device has confirmed that it is necessary to make sure that the system is in operation. The equipment for quantitative analysis is available for analysis and analysis, and for example, to decompose the sample. The equipment for quantitative analysis, the equipment for quantitative analysis, the device for quantitative analysis, the method for decomposition. In a short period of time, it is necessary to analyze the key components of temperature management, humidity management, and non-invasive interface activity of organic solvents. The information system is required to obtain information about the method of information management. There are fewer notices and more information on all kinds of management equipment. The equipment is used for the registration of the equipment, the examination case of the equipment, and the registration of the new case. The method of management is related to the text and the table.