難治性慢性疼痛時のミクログリアにおけるP2×4受容体発現増強分子の同定

顽固性慢性疼痛期间增强小胶质细胞 P2×4 受体表达的分子的鉴定

基本信息

批准号：
17650111
负责人：
津田誠
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

難治性疼痛動物モデルの脊髄後角において,P2X_4受容体の発現がミクログリアで著明に増加し,同受容体の遮断が異常痛覚アロディニアを抑制することから,その発症にミクログリアにおけるP2X_4受容体の発現増加が重要なステップであることを以前の研究で示した.本研究計画の前年度までに,ミクログリアにおけるP2X_4発現制御分子を初代培養ミクログリア細胞で探索し,細胞外マトリックス分子であるフィブロネクチンをその候補として見出した.そこで本年度はフィブロネクチンのin vivoでの役割に焦点を絞り,ブロネクチン受容体(インテグリン)拮抗薬エチスタチンを用いて,P2X_4受容体発現増加と難治性慢性疼痛に対する効果を検討した.先ず,フィブロネクチンによるP2X_4受容体発現増加効果がエチスタチンの前処置により抑制されることを初代培養ミクログリアにおいて明らかにした.そこで,エチスタチンを難治性慢性疼痛モデルラットの脊髄くも膜下腔内へ7日間投与したところ,P2X_4受容体の発現増加は,エチスタチンの用量に依存して有意に抑制され,アロディニア行動も著明に抑制された.しかし,エチスタチンは一旦形成したアロディニアに対しては抑制効果を示さなかった.これらの結果から,フィブロネクチンはその受容体であるインテグリンを介して,in vivo疼痛病態モデルにおけるP2X_4受容体発現増加因子として重要な役割を果たしていることを明らかにした.また,フィブロネクチン/インテグリンシグナル系は,神経損傷による難治性疼痛の形成過程に重要であることも明確にした.

先前的研究表明，小胶质细胞中P2X_4受体的表达增加是在难治性疼痛动物模型中脊髓背角中小胶质细胞中的重要一步。由于受体的阻滞抑制了异常的疼痛异常，因此小胶质细胞中P2X_4受体的表达增加是开发它的重要一步。在该研究项目的前一年，我们在原代培养的小胶质细胞中搜索了小胶质细胞中的P2X_4表达控制分子，并发现细胞外基质分子纤连蛋白作为候选者。今年，我们决定在纤连蛋白中引入纤连蛋白。重点介绍了体内的作用，使用bronectin受体（Iltemin）拮抗剂依托蛋白研究了P2X_4受体表达和难治性慢性疼痛的效果。首先，我们揭示了纤连蛋白增加的P2X_4受体表达的作用被依抗蛋白的预处理抑制。因此，当在难治性的慢性慢性疼痛的难治性慢性疼痛模型中，在大鼠的脊柱亚蛛网膜下腔空间中施用et蛋白时，P2X_4受体表达的增加被显着抑制，具体取决于依托蛋白的剂量，而异肌行为受到了显着抑制。然而，埃托蛋白一旦形成对异质性异体症没有抑制作用。从这些结果中，纤连蛋白能够通过其受体整联蛋白静脉内诱导。已经揭示了它在体内疼痛病理模型中P2X_4受体表达的增加起着重要作用。它还澄清说，纤连蛋白/整合素信号系统对于由神经损伤引起的顽固性疼痛很重要。