乾海苔中の有用酵素の安定化機構に関する研究

干海藻中有用酶的稳定机制研究

• 批准号: 17658097
• 负责人: 村上 昌弘
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kyoritsu Women's University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17658097/
• 关键词: 岩海苔; アデニリックデアミナーゼ; イノシン酸; 旨味成分; AMP; 有用酵素; 乾海苔; 酵素; アデニリックデミナーゼ; 5'-IMP; 旨み成分

【目的】岩海苔(Porphyra pseudolynearis)は独特な香りと風味を有し、海苔類の中でも高級なものとされている。乾岩海苔を焙焼後、温水に浸漬すると海苔の旨味成分である5'-IMPが急激に増加し、旨味が増すことが知られており、これにはアデニリックデアミナーゼ(ADase)の関与が示唆されている。また、高温処理によっても乾岩海苔中のADase活性は消失せず、酵素学的にも興味深い。本研究では、ADaseの安定化機構の解明を最終目的とし、ADaseの単離・精製法、さらに酵素の大量抽出法について検討を加えた。【方法】試料の乾岩海苔は、西伊豆土肥産のものを使用した。トリス酢酸緩衝液で抽出した酵素液にADase活性が認められたので、以下の方法により精製を試みた,すなわち試料に、リン酸カリウム緩衝液を加えてホモジナイズし、遠心分離した。透析・脱塩後、弱陰イオン交換体であるCellulose phosphate樹脂で処理し、0.45M〜1.0M KClを含む緩衝液によるリニアグラジエント法により分画した。次に、5'-AMP agaroseによるアフィニティークロマトグラフイー、続いてButyl Toyopear1650Sによる疎水クロマトグラフィーを行った。【結果】Cellulose phosphateカラムクロマトグラフイーの結果、ADase活性はKCl濃度0.5M付近に回活性画分を限外濃縮し5'-AMP agaroseを用いるアフィニティーカラムクロマトグラフィーに付したとKCl濃度0.2M付近に回収された。さらに硫安濃度1.5M〜0MまでのButyl Toyopear1650Sを用いる疎グラフィーに付した結果、硫安濃度1.3M付近に活性があり、5'-AMPを基質とした酵素反応試験の結果にADase活性が認められた。ポリアクリルアミドゲル電気泳動を行い、銀染色をした結果、薄い複数のバされたが、その中でも濃かった6万付近のバンドがADaseであると推測された。

[objective] the unique fragrance of rock seaweed (Porphyra pseudolynearis) is different from that of middle and high-level sea moss. After baking dry rock seaweed, soak it in warm water, soak it in warm water and soak it in warm water. The ingredients of the seaweed, the 5'-IMP, the flavor, the taste, the taste, the flavor, the taste, the taste, the flavor, the taste, the flavor, the flavor, the taste, the taste The activity of ADase in dry rock seaweed has disappeared, and the enzyme science has a deep taste. In this study, ADase stabilization mechanism was used to explain the most important purpose, ADase isolation method, enzyme extraction method and enzyme extraction method. [methods] dry rock seaweed and west Izu soil were used. The ADase activity of the enzyme solution was extracted, and the following methods were used to determine the activity of the enzyme solution. The following methods were used to test the material, acid and acid solution, and to separate the heart from each other. After dialysis, the weak body, the Cellulose phosphate, the fat, the 0.45M~1.0M KCl, the liquid, the body, the fat, the liquid, the body, the fat, the liquid, the temperature, the In the second place, 5'-AMP agarose said that he had no problems, and that he was not in a position to do so. He said that he was in a bad situation. The Butyl Toyopear1650S was in danger of losing water. [results] the results showed that the ADase activity KCl was 0.5m and the ADase activity was 0.5m. [results] the results showed that the ADase activity was 0.5m and the KCl was 0.5m. [results] the results showed that the KCl activity was 0.5m and 0.5m, which was close to the active painting limit. The temperature of thioampere was 1.5m ~ 0m. The results of Butyl Toyopear1650S were compared with those of thioampere (1.3m) and 5'-AMP. The results of enzyme reverse enzyme assay showed that the activity of ADase was confirmed. You need to pay more than 60, 000 yuan for each other, such as the swimming program, the results of the dye test, the thin complex number, and the price of 60, 000, 000,