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RNAiによるHPV陽性口腔扁平上皮癌の遺伝子治療および遺伝子予防

利用RNAi对HPV阳性口腔鳞状细胞癌进行基因治疗和基因预防

基本信息

批准号：
17659640
负责人：
今井裕
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Dokkyo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659640/
关键词：
口腔癌 HPV 定量PCR 疣贅癌 p53 ヒト乳頭腫ウイルス E6 E7 RNA発現 PCR

项目摘要

本研究の目的は、ヒトロ腔扁平上皮癌において、ヒト乳頭種ウィルス(human papilloma virus : HPV)感染の関与について検索することである。ヒト子宮頚癌培養細胞(HeLa、CaSki)細胞を内部コントロールとして用い、HPV16あるいはHPV18 oncoprotein(E6およびE7)の発現量を、ヒトロ腔癌外科切除症例70例を対象に、TaqMan-PCRにて定量化し、発現を検討した。方法としては、PCR用プライマーとTaqManプローブは、HPV16あるいはHPV18ゲノム内のE6のopen reading frame上に設定した。さらに、CaSki細胞と、HeLa細胞から調整したmRNA逆転写したcDNAを段階希釈した鋳型を用いて、設定したプライマーとプローブがそれぞれ、HPV16-E6,E-7とHPV18-E6,E-7を特異的かつ定量的に増幅することを確認した。次に、当教室で外科的切除した口腔扁平上皮癌70症例を対象にHPV16-E6,E7とHPV18-E6,E7 mRNAの発現を検索した。HPV16-E6,E7は、70症例中11症例で発現が認められた。しかしながら、HPV18-E6,E7 mRNAの発現はいずれの症例においても認められなかった。以上より、口腔扁平上皮癌の発生にHPV16の感染と、oncoprotein E6,E7の発現が関与していることが明らかとなった。また,70例すべての症例で癌抑制遺伝子p53の核内異常蓄積の検索を行ったが,HPVの感染とp53の異常(遺伝子変異)に関連はなく,癌の進展の過程で,p53の変異が入った可能性が示唆された。さらにHPV陽性症例と陰性症例で臨床病理学的な差を検索したところ,組織学的に陽性症例は乳扇状の増殖を示すものが多いが,すべてではなく,周辺粘膜には高頻度にコイロサイトーシスが見られた。腫瘍の発生部位や組織型に大きな偏りはなく,予後も両者で有意な差は認められなかった。

The purpose of this study was to detect the infection rate of human papilloma virus: HPV in patients with flat epithelial carcinoma of the lumen and breast. The tumor culture cells (HeLa, CaSki) were divided into four groups: the internal cell (HeLa, E7), the HPV18 oncoprotein (E6, E7), the surgical resection of luminal carcinoma (70 cases), the quantification of TaqMan-PCR, and the detection of tumor. The method is to set the settings on the E6 open reading frame in the following steps: PCR, TaqMan, HPV18, and E6. The target, the CaSki cell, the HeLa cell, and the mRNA counter are used to reverse write the cDNA section. This section is intended to be used, the configuration is configured, and the quantitative response of the HPV16-E6,E-7 HPV18-E6,E-7 signature is confirmed. For the second time, surgical resection was performed in the classroom. 70 cases of oral flat epithelial carcinoma were diagnosed as HPV16-E6, E7 HPV 18-E6 and E7 mRNA. Of the 70 cases of HPV16-E6,E7 syndrome, 11 cases showed abnormal symptoms. Please tell me that there is a case of diarrhea in the HPV18-E6,E7 mRNA. HPV16 infection was found in patients with oral squamous cell carcinoma and oncoprotein E6 and E7 in oral squamous cell carcinoma. In 70 cases of cancer suppressor gene, p53 gene was often stored in the nucleus of cancer suppressor gene, and p53 gene was often stored in the nucleus of HPV infection. P53 gene infection was often complicated by cancer progression. Cases of HPV