唾液キットを用いた小児のストレス計測法の確立

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小児の情動変化に関する疫学調査は数多く存在するが、簡便で実用的且つ客観的に情動変化を評価する方法は確立されていない。そこで申請者は、唾液中のストレスマーカーであるクロモグラニンAの濃度変化を指標に小児の外部行動を引き起こす情動変化を客観的且つ簡便に把握するための第一歩として小児の外部行動評価法の仮説モデル、さらに行動評価と心理評価の関連仮説モデルもまた構築した。過去の研究ではストレスとなる歯科処置前後において、唾液中のクロモグラニンA濃度変動に有意差がないとの報告もある。過去の研究は唾液採取時間が各々であることから、本研究ではまず歯科処置を行いストレス負荷後、クロモグラニンA濃度上昇が有意にみられる時間を予備研究として調査している。予備研究において歯科処置前後、患者を時間的に拘束できないため、歯科処置前後の唾液サンプルは家庭で冷凍保存(-18℃)し、冷凍宅急便(-18℃)での郵送後、-80℃保存を予定していたが、成人3人を対象に-18℃下での長時間保存はSDS-PAGE・銀染色実施の結果、10〜100KDa間のたんぱく質分解を認め、加えてYKO70Human Chromogranin A EIA実施の結果は1時間後にクロモグラニンAの濃度低下を認めたため予備研究はリアルタイムで行うことが必須と判断された。この結果を踏まえて、シーラント処置を行う小児4人を対象にリアルタイムで術前(処置30分前・15分前)・処置直前・処置直後・術後(処置30分後・15分後)に唾液採取を行い、YKO70Human Chromogranin A EIAを実施した結果、3名が処置直前に有意な濃度上昇を認めた。しかし1名は処置直前に有意に濃度低下を認めた。今後は対象人数を増やし、クロモグラニンA濃度変動時間の特定、さらにクロモグラニンA濃度変動パターンを分類し、クロモグラニンA濃度測定と小児の外部行動評価法の仮説モデル、さらに行動評価と心理評価の関連仮説モデルを比較検討し、ストレスを受けやすい小児を判定していく予定である。