ダイズタンパク質の生産を調節する小胞体品質管理機構に関する研究

调控大豆蛋白生产的内质网质量控制机制研究

• 批准号: 18658055
• 负责人: 裏出 令子
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18658055/
• 关键词: 小胞体; 小胞体ストレス; 品質管理機構; フォールディング; 分子シャペロン; プロテインジスルフィドイソメラーゼ; BiP; カルレチキュリン; folding; protein disulfide isomerase; calreticulin

平成19年度はダイズ種子貯蔵タンパク質の高次構造形成に関わる小胞体タンパク質を同定し、それらの構造・機能解析及び発現パターン解析を行った。まず、アレイ解析による小胞体タンパク質品質管理関連タンパク質を探索した。その結果、約480種の遺伝子を選別した。これにより得られた情報を植物の遺伝子データベース(TIGRダイズESTクローン情報、TAIR Arabidopsis thalianaゲノム情報等)上でFASTAホモロジー検索によりパラログ遺伝子を探査し、高次構造形成に関わるタンパク質12種類を同定した。TIGRダイズESTクローン情報を元にデザインしたプライマーを用いて、13種類の遺伝子のcDNAをクローニングし一次構造を明らかにした。さらに、6種類の遺伝子についてゲノム遺伝子をクローニングし、エキソン・イントロン構成を明らかにした。クローニングしたcDNAを用いてリコンビナントタンパク質の大腸菌での大量発現、純化、抗体作製を行った。ダイズ種子登熟過程におけるmRNA及びタンパク質の発現推移を明らかにした。これらのうち、プロテインジスルフィドイソメラーゼファミリータンパク質7種について、酵素活性及び分子シャペロン活性を測定し、5種類に酵素活性を6種類に分子シャペロン活性を検出した。さらに、未熟大豆種子を用いて免疫沈降実験を行い4種類のプロテインジスルフィドイソメラーゼファミリーがグリシニンの前駆体と小胞体で会合していることを証明した。また、3種類はβコングリシニンとも会合し、これら主要種子貯蔵タンパク質の高次構造形成への関与を世界に先駆けて証明した。

In Pingcheng, in the year 19, the production of small cell bodies was highly accurate, and the machine was able to parse and analyze the data. To analyze and analyze the small cell body, product management, exploration and exploration. According to the results of the test, about 480 samples were selected. This is the best way to get a better understanding of the situation. On the FASTA (TIGR), EST, TAIR Arabidopsis thaliana, and so on, you can use the FASTA device to detect the information, and create a high-level device to create the same license for each of the 12 categories. The TIGR information system is sensitive and accurate. You can use the information system, the cDNA information system, the information system, and make the information system once. Please tell me that the information is not available in the first half of the year. This is the first time that a large number of bacteria have been detected, chemized, and antibodies have been detected in cDNA. After the completion of the process, we will learn more about the progress of the mRNA and the progress of the process. The determination of 7 kinds of enzyme activity, enzyme activity and molecular enzyme activity, 5-chain enzyme activity and 6-chain molecular enzyme activity test were used in this study. Unripe and unripe soybean seeds were immunized with the vaccine, and the mice were immunized with the vaccine. The mice were immunized and immunized with the vaccine. For example, the β-ray and the third class will meet each other, and the main products will be created in a high-level way to form the information center and the world leader.

项目成果

新規植物プロテインジスルフィドイソメラーゼファミリー,PDIL-3a及びPDIL-3b

新型植物蛋白二硫键异构酶家族 PDIL-3a 和 PDIL-3b

• 发表时间: 2007
• 作者: 岩崎健祐;和田濱裕之;鎌内慎也;河田照雄;裏出令子
• 通讯作者: 裏出令子

A novel plant protein disulfide isomerase family homologous to animal P5 – molecular cloning and characterization as a functional protein for folding of soybean seed‐storage proteins

• DOI: 10.1111/j.1742-4658.2007.06199.x
• 发表时间: 2008-02
• 期刊: The FEBS Journal
• 作者: Hiroyuki Wadahama;S. Kamauchi;Yumi Nakamoto;K. Nishizawa;M. Ishimoto;T. Kawada;R. Urade

分子シャペロン活性を有するダイズ新規PDIファミリーGmPDIL-3a及びGmPDIL-3bの同定と機能解析

具有分子伴侣活性的新型大豆 PDI 家族 GmPDIL-3a 和 GmPDIL-3b 的鉴定及功能分析

• 发表时间: 2008
• 作者: 岩崎健祐;和田濱裕之;鎌内慎也;河田照雄;裏出令子
• 通讯作者: 裏出令子

Protein disulfide isomerase family proteins involved in soybean protein biogenesis

• DOI: 10.1111/j.1742-4658.2006.05613.x
• 发表时间: 2007-02
• 期刊: The FEBS Journal
• 作者: Hiroyuki Wadahama;S. Kamauchi;M. Ishimoto;T. Kawada;R. Urade

Cellular response to unfolded proteins in the endoplasmic reticulum of plants

• DOI: 10.1111/j.1742-4658.2007.05664.x
• 发表时间: 2007-03
• 期刊: The FEBS Journal
• 作者: R. Urade