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ナノ粒子の細胞毒性に関する研究:均一分散系を用いた粒子径依存性の評価

纳米粒子的细胞毒性研究：使用均匀分散系统评估粒径依赖性

基本信息

批准号：
18659034
负责人：
上野明道
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Ohu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

(1)細胞内局在部位の同定…平均粒子径が、2,10,20,50,80nmの市販金コロイドを分化可能な接着細胞であるマウス頭蓋冠由来前骨芽細胞MC3T3-E1へ0.001〜0.05mg/mlで曝露した。Alamar Blueで定量できるミトコンドリア還元性で細胞毒性が検出された2、10nmサイズの金ナノ粒子0.005mg/mlを3日間曝露した後に透過型電子顕微鏡観察すると、金粒子はクラスターを形成しvesicle中にも存在するが、主にリソソーム内に取り込まれていた。一方、20,50,80nmサイズの金ナノ粒子0.05mg/mlの3日間の曝露では細胞毒性は認められず、金粒子は分散された形でendocytic vesicleに認められた。いずれも核内には検出されなかった。これらの結果は、半導体ナノ粒子での研究や本研究遂行中にHeLa細胞等を用いて発表された他の研究グループによる結果と一致している。(2)凝集を防ぐ方法の確立…MC3T3-E1細胞の骨芽細胞への分化誘導には約10日間を要すため、その間に細胞外マトリックス上で金コロイドの凝集が認めれた。クエン酸安定化金コロイドは、培養中に血清タンパク質が金粒子表面のクエン酸の負荷電と相互作用したり、交換反応を引き起こすなど様々な反応を引き起こす可能性もあり、凝集を防ぐ手立ては見出せなかった。(3)細胞分化に及ぼす影響…20,50,80nmサイズの金ナノ粒子による曝露でも6日間を越えると、細胞毒性とマトリックス上でのクラスターの形成が認められ、骨様結節(ノジュール)の定性・定量に問題が生じ、ナノスペース理論を証明できなかった。

(1)The average particle size of MC3T3-E1 cells was 2,10,20,50,80nm, and the differentiation of MC3T3-E1 cells was possible after exposure to 0.001 ~ 0.05 mg/ml. Alamar Blue is a quantitative and quantitative indicator of cytotoxicity. It detects the presence of gold particles at 2 and 10nm. It detects the presence of gold particles at 2 and 10 nm. A square, 20,50,80nm gold particles 0.05 mg/ml and 3 days of exposure to cytotoxicity, gold particles dispersed in the form of endocytic vehicle In the middle of the room, there was a small room. These results are consistent with those obtained from the study of semiconductor particles and HeLa cells in this study. (2)The method of preventing aggregation was established. The differentiation of MC3T3-E1 cells was induced in vitro for about 10 days. Acid Stabilized Gold Particles in Cultures: Serum, Substance, Load Electric Interaction of Acid on Gold Particles Surface, Exchange Reaction, Reaction, Possibility, Agglutination Prevention (3)Cell differentiation and the effects of exposure to gold particles at 20,50,80nm. Cytotoxicity. Identification of the formation of bone nodules. Qualitative and quantitative problems.