侵害刺激に対するアセチルカルニチンの鎮痛効果について

关于乙酰肉碱对有害刺激的镇痛作用

• 批准号: 18659466
• 负责人: 田村 仁美
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: University of Occupational and Environmental Health, Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659466/
• 关键词: ミクログリア; アセチルLカルニチン; アセチルカルニチン; 鎮痛; ミクログリア紬胞; サイトカイン; ATP

実験1ラットアストログリァ細胞(以下RCR-1細胞)におけるLPS及びATP刺激によるTNFα産生試験RCR-1細胞を5×105/m2に調整し,500μ2を24穴プレートにて37℃で12時間培養した。PBS洗浄後,DMEM+10%FBS 500μを添加し,LPS濃度0,0.1,1,10,20ng/meまたはATP濃度0,1,10,100,500mM,IMを加えた。37℃で6時間培養後,TNFα産生量を測定した。実験(2)ラットミクログリ7細胞(住友ベークライト社)におけるアセチルLカルニチン(ALC)によるLPS刺激下TNFα産生抑制試験1)ラットミクログリア細胞を5×105/m2に調整iし,100μ2を96穴プレートにて37℃で12時間培養した。PBS洗浄後,専用ミクログリア試験液を150μG添加し,LPSO,10,100ng,1,10μg/m1で刺激し,37℃で6時間培養後,TNFα産生量を測定した。2)同様に調整したラットミクログリア細胞に,ALC濃度0,1,10,100μM,1,5mMを添加後15分後にLPS100ng/m2を加えた。37℃で6時間培養後,TNFα産生量を測定した。結果実験(1)TNFα assaykitを用いてTNFαレベルを測定した。LPSおよびATP刺激各濃度下のTNFαは非常に低レベルであった。TNF α assay kit Ultra sensitiveを用いて高感度測定したが,TNFαレベルは最高9.4pg/me未満となり有意な反応は認められなかった。実験(2)1)LPS濃度依存性にTNF-α産生が増加する傾向は認められたが,データのばらつきが大きく,有意な濃度依存性は認めなかった。TNF-α産生が得られやすいLPS濃度100ng/mlで刺激したが,ALCが濃度依存性にTNF-α産生を有意に抑制する結果は現在のところ得られていない。

RCR-1 cells were incubated at 5×105/m2 for 24 hours at 37℃ for 12 hours. After PBS washing,DMEM+10% FBS 500μ m was added,LPS concentrations were 0, 0.1, 1, 10, 20ng/me, ATP concentrations were 0,1,10,100, 500mM,IM was added. TNFα production was measured after incubation at 37℃ for 6 hours. (2) Inhibition of TNFα production by LPS stimulation in cell culture (Sumitomo Biotech Co., Ltd.) 1) Cell culture at 37℃ for 12 hours at 5×105/m2. After PBS washing,TNFα production was measured by adding 150μG of the test solution,LPSO,10,100ng,1,10μg/m1 and incubation at 37 ℃ for 6 hours. 2)ALC concentrations of 0, 1, 10, 100 μM,1,5mM were added 15 min after LPS100ng/m2 addition. TNFα production was measured after incubation at 37℃ for 6 hours. Results: (1)TNFα assay was used to detect TNFα. TNFα was very low at all concentrations stimulated by LPS and ATP. TNF α assay kit Ultra sensitive assay with high sensitivity,TNFα assay maximum 9.4pg/me (2)1)LPS concentration-dependent TNF-α production tends to increase, and intentional concentration-dependent TNF-α production tends to increase. TNF-α production was stimulated by LPS concentration of 100ng/ml, and TNF-α production was inhibited by ALC concentration.

项目成果

エンドトキシン研究9アセチルカルニチンのエンドトキシンショックに及ぼす効果(pp64-69)

内毒素研究9乙酰肉碱对内毒素休克的影响（第64-69页）

• 发表时间: 2006
• 作者: M. Hayashi;S. Maeda;H. Aburatani;K. Miyazono;T. Imamura.;佐藤 正章;緒方政則 他
• 通讯作者: 緒方政則 他