神経幹細胞のニューロスフェア培養における増殖プロセス評価

神经干细胞神经球培养增殖过程的评价

• 批准号: 19656219
• 负责人: 田谷 正仁
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19656219/
• 关键词: 生物・生体工学; 神径幹細胞; 再生医療; 集塊形成計; 分化; 遊走性

本申請課題「神経幹細胞のニューロスフェア培養における増殖プロセス評価」では,神経幹細胞の増殖特性ならびに細胞集塊の生成機構,さらには集塊内における未分化/分化細胞の判定と品質評価に関し,定量的な規範を策定することを目的とし,以下の視点からの検討を集中して行なった.培養初期段階における単一細胞の移動(遊走性)と細胞合一頻度との関係神経幹細胞の培養では,播種された単一細胞は,培養面に強固に接着することなく培養面を移動する(遊走性を示す)ことが認められている.この遊走性が細胞の合一における推進力,ひいてはニューロスフェア形成のトリガーとも考えられる.細胞の遊走性に関しては,細胞観察と画像解析ツールを活用し,神経幹細胞の遊走性を定量的に把握したところ,遊走性の増大は,集塊形成を促進していることがわかった.細胞集塊内のポピュレーション(未分化/分化細胞)評価と培養プロセスパラメータとの相関集塊の品質評価の観点から,集塊内におけるポピュレーションバランスを解析するための「Imagecytometory」システムを開発した.まず,細胞集塊の組織切片を作成し,種々の状態の細胞種を識別するため蛍光染色を施す.異なる培養条件から得られた組織切片サンプルを共焦点レーザースキャン顕微鏡下で観察し,蛍光画像を取得する.上記項目で得られたデータも考慮して,神経幹細胞のニューロスフェア培養における,増殖・分化といった細胞のアクティビティとクオリティーに関する総合的評価を可能とした.

The subject of the present application,"Evaluation of the proliferation of neural stem cells in culture," focuses on the evaluation of the quality of undifferentiated/differentiated cells in aggregates and the establishment of quantitative criteria for evaluating the proliferation characteristics of neural stem cells and the mechanisms for generating aggregates. The relationship between cell migration (mobility) and cell integration frequency in the initial stage of culture and the culture of stem cells. This kind of mobility and cell unity are propulsive forces, and the formation of the cell is very difficult. Cell migration is related to cell observation and profiling, quantitative control of migration of neural stem cells, increase of migration, and promotion of aggregation. Evaluation of cell clusters (undifferentiated/differentiated cells) in culture and quality evaluation of related clusters, analysis of cell clusters in culture and development of "Imagecytometry" system. Tissue sections of cell aggregates were prepared to identify cell species in their state. Different culture conditions were obtained by confocal microscopy. The above mentioned project has been considered to be a comprehensive evaluation of the development and differentiation of neural stem cells.

项目成果

ヒト神経幹細胞の分化率の評価

人神经干细胞分化率评价

• 发表时间: 2007
• 作者: Hideki Mori;Kazuaki Ninomiya;Yonehiro Kanemura;Mami Yamasaki;Masahiro Kino-oka and Masahito Taya;森 英樹
• 通讯作者: 森 英樹

Image Cytometry for Analyzing Regional Distribution of Cells Inside Human Neurospheres

用于分析人类神经球内细胞区域分布的图像细胞术

• 发表时间: 2007
• 期刊: J. Biosci. Bioeng 103
• 作者: Hideki Mori;Kazuaki Ninomiya;Yonehiro Kanemura;Mami Yamasaki;Masahiro Kino-oka and Masahito Taya
• 通讯作者: Masahiro Kino-oka and Masahito Taya

Observational Examination of Aggregation and Migration in Early Phase of Neurosphere Culture of Mouse Neural Stem Cells

小鼠神经干细胞神经球培养早期聚集和迁移的观察检查

• 发表时间: 2007
• 期刊: J. Biosci. Bioeng 104
• 作者: Hideki Mori;Toshika Fujitani;Yonehiro Kanemura;Masahiro Kino-oka and Masahito Taya
• 通讯作者: Masahiro Kino-oka and Masahito Taya