低酸素環境下における血管系の神経情報変換・伝達機構

低氧环境下血管系统神经信息转换/传递机制

• 批准号: 01480139
• 负责人: 藤原 元始
• 金额: $ 3.52万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01480139/
• 关键词: 低酸素; 交感神経; クロマフィン細胞; カテコ-ルアミン; カルシウムイオン; ニコチン受容体; カルシウムチャンネル

牛副腎髄質より、酵素的方法(collagenase及びDNase)を用いて副腎髄質細胞を調整した後、Percoll濃度勾配遠心及びdifferential platingを用いて単離クロマフィン細胞を作成した。3-7日間CO_2インキュベ-タ-にて培養した後、クロマフィン細胞を対照(21%酸素/79%窒素で平衡化)または低酸素栄養液(100%窒素で平衡化)中にて高K^+で刺激すると、遊離されるカテコ-ルアミン量は低酸素により約50%に低下した。この結果は血管条片からの電気刺激による〔^3H〕ノルアドレナリン遊離が低酸素により抑制されることとよく一致することから、培養副腎クロマフィン細胞が血管支配交感神経のモデルとなることが確認できた。ノルアドレナリン遊離は、細胞内自由Ca^<2+>濃度(〔Ca^<2+>〕i)に依存すると考えられている。低酸素によるカテコ-ルアミン遊離抑制のメカニズムを明らかにするために、カルシウム指示薬であるFura-IIを用いて、高K^+刺激により誘発される〔Ca^<2+>〕iの増加に対する低酸素の影響を検討した。高K^+刺激により誘発される〔Ca^<2+>〕iの増加は低酸素により約50%に減少した。さらに、この〔Ca^<2+>〕iの増加の抑制機構を明らかにするために、電位依存性Ca^<2+>チャンネル機能の生化学的指標である細胞内への^<45>Ca^<2+>取り込みを検討したところ、高K^+刺激により誘発される^<45>Ca^<2+>の取り込み増加が低酸素により抑制された。以上の結果から、高K^+刺激により誘発されるカテコ-ルアミン遊離の低酸素による抑制は、電位依存性Ca^<2+>チャンネル機能抑制に起因する〔Ca^<2+>〕i増加の抑制によることが明らかとなった。

The methods of collagenase and enzyme (collagenase and DNase) were used to prepare the cotyledon cells, then the Percoll was used to match the center and the differential plating was used to isolate the cells. During the period of 3-7 days, CO_ 2 was exposed to high K ^ + stimuli in the low acid solution (balance of 21% acid

项目成果

Ken Lee: "Effects of hypoxia on nicotine-induced catecholamine release and its regulatory mechanism in cultured bovine adrenal chromaffin cells" Journal of Neurochemistry.

Ken Lee：“缺氧对尼古丁诱导的儿茶酚胺释放的影响及其在培养的牛肾上腺嗜铬细胞中的调节机制”《神经化学杂志》。

Yasunori Hayashi: "Enhancement of in vivo tyrosine hydroxylation in the rat adrenal gland under hypoxic conditions" Journal of Neurochemistry. (1990)

Yasunori Hayashi：“缺氧条件下大鼠肾上腺体内酪氨酸羟基化的增强”神经化学杂志。

Ken Lee: "Characterization of nicotinic cholinergic receptors in cultured adrenal chromaffin cells by(-)-〔^3H〕nicotine binding assay" Journal of Neurochemistry.

Ken Lee：“通过(-)-[^3H]尼古丁结合测定对培养的肾上腺嗜铬细胞中的烟碱胆碱能受体进行表征”《神经化学杂志》。

Ken Lee: "Effects of hypoxis on the catecholamine release,Ca^<2+>-influx and cytosolic free Ca^<2+> concentration in cultured bovine adrenal chromaffin cells" Journal of Neurochemistry. (1990)

Ken Lee：“缺氧对培养的牛肾上腺嗜铬细胞中儿茶酚胺释放、Ca^2-流入和胞质游离Ca^2浓度的影响”《神经化学杂志》。

Ken Lee: "Effects of hypoxia on nicotinic cholinergic receptors in cultured adrenal chromaffin cells as studied by(-)-〔^3H〕nicotine binding assay" Journal of Neurochemistry.

Ken Lee：“通过(-)-[^3H]尼古丁结合测定研究缺氧对培养的肾上腺嗜铬细胞中烟碱胆碱能受体的影响”《神经化学杂志》。