腎遠位尿細管培養細胞に対する抗利尿ホルモン作用の分子機構
抗利尿激素对培养的肾远曲小管细胞作用的分子机制
基本信息
- 批准号:05670058
- 负责人:
- 金额:$ 0.83万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
- 财政年份:1993
- 资助国家:日本
- 起止时间:1993 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
アフリカツメガエル腎遠位尿細管由来の培養細胞(A6細胞)にパッチクランプ法を用いて、抗利尿ホルモン作用の分子レベルの解析を試みた。今回はCO_2インキュベータ等の設定条件が哺乳動物と異なりA6細胞の使用が困難となったために、アフリカツメガエルと同様の両性類(食用蛙)の単離尿細管細胞を用いて実験した。この細胞を用いた実験の報告はあまりなく、当教室でも細胞条件を決定するためにかなりの時間を費やした。そのため現時点では、抗利尿ホルモン作用実験の予備段階として、単離尿細管細胞に存在するチャネルの解析を行った。実験には、コラゲナーゼ処理した食用蛙二重潅流腎から尿細管細胞を単離して用いた。電極の先端径は2mum以下でシール抵抗は50OMEGA以上のもので実験した。1.まずwhole-cell recordingを行って、細胞膜全コンダクタンスを測定しながらイオンチャネル阻害剤を投与すると、5mMBa溶液でコンダクタンスが減少し、溶液K濃度を増すとコンダクタンスが増大した。これよりKチャネルの存在が示された。2.次に、cell-attached patchにより3種類のチャネルが出現し、inside-out patchで電流電圧曲線を求めると、これらのチャネルがそれぞれ約250pS、70pS、20pSの単一チャネルコンダクタンスを有するKチャネルであることが分かった。3.70pSのKチャネルは内向き整流性があり、細胞内酸性化でチャネル活性は抑制され、アルカリで活性化された。以上の結果より、食用蛙単離尿細管細胞には、単一チャネルコンダクタンスが約250pS,70pS、20pSのKチャネルが存在し、70pSのチャネルはpH感受性を有することが分かった(第71回日本生理学会大会発表)。これらのデータを踏まえて、次の段階では抗利尿ホルモンの作用を調べる。
We tried to use the Percockranp method on cultured cells (A6 cells) derived from distal urinary tubules of the kidney and analyze the molecular changes in the antidiuretic effect. In this paper, the setting conditions of CO_2 emission and so on are difficult to use in mammals and A6 cells, and the use of isolated urine tubule cells of the same sex (food frog) is difficult. The time spent in the classroom to determine the conditions of the cell The analysis of the preliminary stage of anti-diuretic action and the existence of isolated urinary tubule cells In addition to the above, it is also possible to use the cells of the urinary tubule of the edible frog. The electrode tip diameter is less than 2mum, and the resistance is more than 50OMEGA. 1. Whole-cell recording was carried out, cell membrane total cell mass was measured, and the cell mass was decreased by adding a protective agent to 5 mM solution, and the cell mass was increased by increasing the K concentration of the solution. This is the first time I've ever seen a woman. 2. 3 types of cell growth occurred in the second, cell-attached patch, and the current voltage curve of the inside-out patch was calculated. The cell growth was approximately 250pS, 70pS, and 20pS. 3. 70pS K cells are inverted and acidified, and cell activity is inhibited and inactivated. The above results show that the average length of a single chick chick The effect of antidiuretic drugs on the immune system is regulated in the following stages:
项目成果
期刊论文数量(9)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
MarunakaY.: "Antidiuretic hormone-responding non-selective cation channel in distal nephron epithelium(A6)." Am.J.Physiol.発表予定. (1994)
MarunakaY.:“远端肾单位上皮中的抗利尿激素反应非选择性阳离子通道(A6)。”Am.J.Physiol 计划出版(1994 年)。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
窪田隆裕: "別冊・医学のあゆみ腎疾患(尿細管と電解質輸送機構)" 医歯薬出版、東京, 366 (1992)
Takahiro Kubota:“另册:肾病病史(肾小管和电解质转运机制)”石药出版社,东京,366(1992)
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
MarunakaY.: "Insulin activates an amiloride-blockable Na channel in a distal nephron cell line(A6)." Am.J.Physiol.263. F392-F400 (1992)
MarunakaY.:“胰岛素激活远端肾单位细胞系 (A6) 中阿米洛利可阻断的 Na 通道。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
HagiwaraN.: "Effects of dopamine on the transport of Na,H,and Ca in the bullfrog proximal tubule." Jpn.J.Physiol.40. 351-368 (1990)
HagiwaraN.:“多巴胺对牛蛙近端小管中 Na、H 和 Ca 转运的影响。”
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- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
HagiwaraN.: "Effect of insulin and tyrosine kinase inhibitor on ion transport in the alveolar cell of the fetal lung." Biochem.Biophys.Res.Commun.187. 802-808 (1992)
HagiwaraN.:“胰岛素和酪氨酸激酶抑制剂对胎儿肺泡细胞离子转运的影响。”
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- 批准号:
07670067 - 财政年份:1995
- 资助金额:
$ 0.83万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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- 资助金额:
$ 0.83万 - 项目类别:
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