合成ペプチドを用いたHTLV-II型に特異な抗体作製とその中和活性の検討

使用合成肽生产 HTLV-II 型特异性抗体并研究其中和活性

• 批准号: 05670193
• 负责人: 林 一彦
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670193/
• 关键词: HTLV-〓; モノクローナル抗体; 合成ペプチド

HTLV-I感染と区別してHTLV-〓特有の疾患の発見や病因の解明に有用なHTLV-〓特異抗体の作製とその中和活性を検討した結果,以下のようなdataを得た。1.HTLV-〓に特異な抗体作製1)HTLV-〓env gp46の171-196,gp46の185-208とgp46の80-103に相当するそれぞれの合成ペプチドにKLHを結合したものを抗原として型のごとく各2〜3羽のウサギを免疫してその血清を採取後,アフィニティー精製した特異抗体を得た。2)HTLV-〓env gp46,171-196の合成ペプチドを用いて型のごとくモノクローナル抗体を作製した。3)特異性の検討:アフィニティー精製抗体は,ELISA法,Western-blot法,酵素抗体法flow cytometryによって,gp46の17-196,gp46-185-203の特異性は確認できた。(gp46の80-103に対するものは現在検討中)。また,多数のモノクロの中からスクリーニングの結果HTLV-〓に特異なN5-4を得た。(Int.J.Cancer.1993年)2.HTLV-〓特異抗体の感染中和活性の検討結果1)in vivoによる中和活性の検討結果HTLV-〓特異ポリクローナル抗体を作製したウサギ(即ち,ペプチド免疫したもの)に対し,HTLV-〓産生株Si-〓A又はMOTを静注した後,その末血球の感染をPCR法で検討した結果gp46の185-208と171-196に免疫ウサギではHTLV-〓を検出できなかった。(gp46の80-103は今後検討する)2)in vitroにおける中和活性の検討結果水疱性口内炎ウイルスpsendotype assayで,gp46の171-196に対するポリクローナル抗体とモノクロのN5-4は中和抗体が存在せず,gp46の185-208に対するポリクローナル抗体は中和活性が少し(X30〜40)認められた.(gp46の80-103に対するポリクロは今後検討する)

HTLV-I infection, HTLV-specific disease development, etiology and explanation of useful HTLV-specific antibody production and neutralizing activity of the results, the following data were obtained 1. HTLV-env gp46 171-196, gp46 185-208, gp46 80-103, etc., were synthesized and KLH was combined with 2 - 3 antigens and 2 - 3 antigens respectively. After the serum was collected, HTLV-env gp46 was purified and specific antibodies were obtained. 2) Synthesis of HTLV-env gp46,171-196. 3)Specificity test: Purified antibody,ELISA,Western-blot, enzyme antibody flow cytometry, gp46 - 17-196, gp46 -185-203 Specificity test. (gp46 80-103, and now under discussion). Most of them were found in HTLV-1 and N5-4 respectively. (Int. J. Cancer. 1993) 2. Results of Investigation of Infection Neutralizing Activity of HTLV-1 Specific Antibodies 1) Results of Investigation of Neutralizing Activity in Vivo HTLV-1 Specific Antibodies Production of HTLV-1 Specific Antibodies The results of PCR detection of infection in peripheral blood cells were 185-208 and 171-196 respectively. (gp46 2) Study results of neutralizing activity in vitro study vesicular endostomatitis: psendotype assay,gp46 and 171-196; N5-4; presence of neutralizing antibody; gp 46 and 185-208; neutralizing activity of neutralizing antibody: X30 ~ 40. (gp46 80-103, the next question is:

项目成果

Ohara.N.: "A novel monoclonal antibody specifically reactive with human T-lymphotropic virus type-II(HTLV-II)envelope protein" International Journal of Cancer. 54. 858-861 (1993)

Ohara.N.：“一种新型单克隆抗体，与人类 T 淋巴细胞病毒 II 型 (HTLV-II) 包膜蛋白发生特异性反应”，《国际癌症杂志》。