血管内皮細胞に発現する接着因子とmicrofilamentに及ぼす紫外線の影響

紫外线对血管内皮细胞粘附因子和微丝表达的影响

• 批准号: 05670752
• 负责人: 二村 省三
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kansai Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670752/
• 关键词: CD44; UVB; endothelial cell; cytocharasin D

1.目的PUVA療法の作用機序を検討する一助として下記の実験を計画した。ヒト臍帯静脈血管内皮(HUVEC)を用い、アクチンフィラメントとの関連が指摘されるCD44の発現に関して、紫外線照射ならびにサイトカラシン処理前後の変化を、Eセレクチンを対照として発現プロフィールに関してはFACS、形態的変化については共焦点レーザー顕微鏡で検討した。2.実験材料と方法【.encircled1.】ヒト臍帯静脈血管内皮(HUVEC)を培養後、INF‐gamma、IL‐1beta、TNF‐alphaで刺激、CD44とEセレクチンの発現プロフィールをFACSで検討した。【.encircled2.】HUVECに種々の量の紫外線を照射前もしくは後に、IL‐1betaで刺激しCD44とEセレクチンの発現プロフィールの変化をFACSと共焦点レーザー顕微鏡で検討した。【.encircled3.】HUVECを種々の濃度のサイトカラシンDで処理後、IL‐1betaで刺激同様にCD44とEセレクチンの変化をFACSと共焦点レーザー顕微鏡で検討した。3.結果【.encircled1.】INF‐gamma、IL‐1beta、TNF‐alphaの刺激によりCD44は刺激4時間後より発現、8時間後にピークに達した後24時間後には正常に復した。Eセレクチンは刺激2時間後より発現、6時間後にピークとなり24時間後には同様に消失した。【.encircled2.】紫外線をIL‐1beta刺激の前、後のいずれに照射してもCD44の発現は遅れ、ピークは24時間となった。【.encircled3.】サイトカラシン処理後でも、Eセレクチンの発現は通常と変わらなかった。一方CD44の発現は消失する事なく、かえって増強し48時間後でもなお高度に持続していた。【.encircled4.】共焦点レーザー顕微鏡による観察では、アクチンフィラメントは紫外線処理やサイトカラシン処理でもほぼ同様の変化を示したが、CD44とアクチンフィラメントとの関連は不明であった。結論CD44とアクチンフィラメントとの直接的関係はないように思われる。

1. Objective To investigate the mechanism of PUVA therapy and to review its implementation. The relationship between the development of umbilical vein endothelial cells (HUVEC) and the changes of their morphology before and after treatment with ultraviolet radiation was investigated by confocal microscopy. 2. Materials and Methods [.encored1.] After HUVEC culture, INF-gamma, IL-1beta, TNF-alpha stimulation, CD44 and E gene expression were investigated by FACS.【.encircled2.】HUVEC seeds are irradiated with ultraviolet light before and after irradiation, IL-1beta stimulates CD44 and E cells, and the development of HUVEC cells is studied by confocal microscopy.【.encircled3.】The concentration of HUVEC and IL-1beta were measured by FACS confocal microscopy after treatment. 3. Result [.encocled1.] INF‐gamma, IL‐1beta, TNF‐alpha stimulation, CD ‐ 44 stimulation, 4 hours after stimulation, 8 hours after stimulation, 24 hours after stimulation, normal E【.encircled2.】UV IL-1beta stimulation occurs before and after irradiation, and CD-44 appears after irradiation.【.encircled3.】After the treatment, the appearance of E. coli is usually changed. A CD44 appears and disappears. It increases in intensity after 48 hours.【.encircled4.】The focus of the confocal microscope is not clear. The UV treatment is not clear. The CD44 is not clear. Conclusion CD44 is a direct relationship between CD 44 and CD 44.