蛇毒金属酵素阻害物質の研究

蛇毒金属酶抑制剂的研究

• 批准号: 07670060
• 负责人: 丸山 真杉
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: 宮崎医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670060/
• 关键词: 蛇毒; 出血毒; 金属酵素; 阻害物質; フィブリン分解酵素

蛇毒金属酵素阻害物質研究の第一歩として、まず5種類の動物血清とヒト血清の蛇毒金属酵素であるjararafibrase Iの線溶活性に対する阻害活性をフィブリン平板で検討した。その結果マウス、ラット血清では完全阻害が認められたが、ヒト、イヌ、ウサギ、モルモット血清では阻害が見られずに、反対に2〜10倍の活性亢進作用が見出された。次にマウス血清を用いて阻害活性の濃度依存性を確認したところ、血清量が低濃度の場合には約80%のフィブリン溶解活性増強が起こり、濃度を上げていくと抑制がかかりだすことが見出された。36.9μgのjararafibraseを完全阻害するのに29.8μlをマウス血清を要した。同様の阻害実験を^<14>Cでラベルしたgelatinを用いてjararafibrase Iのgelatinase活性に関して検討したところ、マウス血清は非常に強くgelatinase活性を阻害したが、ヒト血清も濃度を上げると阻害が認められることが判明した。したがって、ヒト血清にも阻害物質が存在するが、その濃度がマウス血清に比較して著しく低いか、あるいは阻害比活性が低いことが考えられた。次に血清中のjararafibrase I結合物質の分子量をjararafibrase Iを^<125>Iでラベルし、ヒト及びラット血清とincubation後、SDS電気泳動にかけ、autoradiographyにて検討した。その結果、ヒト血清中ではおそれらくα_2マクログロブリンとみられる非常に高分子量の物質と100%結合しており、ラットではヒトの高分子量結合物質と一致するバンドと、もう一本分子量約180,000のバンドが認められた。現在このラット血清中に存在する高分子量と低分子量のjararafibrase I結合蛋白の精製を試みているところである。

The first step in the study of snake venom metalloenzyme inhibitors was to investigate the inhibitory activity of jarafibrase I in five animal sera and serums. The results showed that the serum was completely resistant, and the anti-serum was 2 ~ 10 times more active. The concentration dependence of the inhibitory activity of the serum was confirmed. When the serum concentration was low, the inhibitory activity was increased by about 80%. 36.9μg of jarafibrase completely blocked 29.8μl of serum. In <14>the same way, the serum concentration of jarafibrase I is very high, and the activity of jarafibrase is very high. For example, the concentration of the harmful substance in the serum is relatively low. The molecular weight of jarafibrase I binding substance in serum was determined <125>by SDS electrophoresis and autoradiography after incubation. As a result, the serum contains a very high molecular weight substance with a molecular weight of about 180,000. There are high molecular weight and low molecular weight jarafibrase I binding proteins in serum.