カンジダ酵母反復配列のin situ hybridizationによる細胞内動態

通过原位杂交重复念珠菌的细胞内动力学

• 批准号: 07670307
• 负责人: 田中 健治
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670307/
• 关键词: FISH; Candida albicans; 細胞周期; 反復配列; 染色体; Mitosis; rDNA; テロメア

われわれは、病原性酵母Candida albicans において、染色体サイズの多様性の解析から,ゲノムの中に約2kbの種特異的反復配列RPSを見出した(Iwaguchi et al.1992)。それがほとんどの染色体に分布し、しかも限定された領域に局在している(Chindamporn et al.1995)、また、その配列がmammalian alphoid DNAに類似していることから、centromere DNAの可能性があるのではないかと推測された(Chibana et al.1994)。本研究では、RPSの細胞内局在について、特にcentromereの可能性を検証する目的でRPSのFISH(Fluorescent in situ hybidization)による研究を行った。同時に抗r-tubulin抗体によるSPBの蛍光抗体染色、DAPIによる核領域の染色を行って、RPSの細胞周期における挙動を明らかにした。また、対照実験として、rDNAとテロメアについても、それぞれ特異的プローブによるFISHをおこない、細胞周期における挙動を明らかにした。rDNA領域は、間期核では、クロマチン領域に隣接する核小体領域にあり、分裂とともに、伸長する紡錘体に沿って棒状に伸び、やがて、2個のループになって、娘核にはいる。テロメアのシグナルは、核の周辺に点状に現れ、分裂のおわりには2核に均等に分布する。RPSは、間期核では、ばらばらに分布しているが、紡錘体の出現とともに、その近傍に集合してみられる。紡錘体が伸長する移行期の核では、紡錘体に沿って並び、やがて、2つのグループにわかれ、それぞれ紡錘体極に集合して観察された。これらの観察によって、C.albicansの核分裂では、中期に染色体が赤道板に整列しないこと、分裂周期のなかで、後期の占める時間が長いのが特徴であることを明らかにした。

わ れ わ れ は, pathogenic yeast Candida albicans に お い て, chromosome サ イ ズ の multiple others の parsing か ら, ゲ ノ ム の に in about 2 KB の RPS を specific repeatedly with column show the し た (Iwaguchi et al. 1992). そ れ が ほ と ん ど の chromosome し に distribution, し か も qualified さ れ た field に bureau in し て い る (Chindamporn et al. 1995), ま た, そ の match column が mammalian alphoid DNA に similar し て い る こ と か ら, centromere DNA <s:1> possibility がある で な な と と と speculation された(Chibana et al.1994). This study で は, RPS の cells in に つ い て, に centromere の possibility を 検 card す る purpose で RPS の FISH (Fluorescent in situ hybidization) に よ る を line っ た. While に resistance r - antibody of tubulin に よ る.spb の 蛍 antibody staining, light DAPI に よ る nuclear field line の dyeing を っ て, RPS の cell cycle に お け る 挙 dynamic を Ming ら か に し た. ま た, polices according to be 験 と し て, rDNA と テ ロ メ ア に つ い て も, そ れ ぞ れ specific プ ロ ー ブ に よ る FISH を お こ な い, cell cycle に お け る 挙 dynamic を Ming ら か に し た. Areas of rDNA は, interphase nuclei で は, ク ロ マ チ ン field に 隣 meet す る nucleosome field に あ り, divided と と も に, elongation す る spindle に along っ て rod-shaped に び, や が て, 2 の ル ー プ に な っ て, niang に は い る. テ ロ メ ア の シ グ ナ ル は week, nuclear の 辺 に dot に れ, split の お わ り に は 2 nuclear に に equal distribution す る. RPS は, interphase nuclei で は, ば ら ば ら に distribution し て い る が, spindle の appear と と も に, そ の nearly set alongside に し て み ら れ る. Spindle が elongation す る transitional period の nuclear で は, spindle に along っ て び and や が て, 2 つ の グ ル ー プ に わ か れ, そ れ ぞ れ spindle pole に collection し て 観 examine さ れ た. こ れ ら の 観 examine に よ っ て, c.a. lbicans の fission で は, medium-term に chromosome が equatorial plate に whole column し な い こ と, division cycle の な か で, late の of め る が long い の が, 徴 で あ る こ と を Ming ら か に し た.

项目成果

A.Chindamporn: "Analysis of the chromosomal localization of the repetitive sequences(RPS) in Candida albicans" Microbiology. 141. 469-476 (1995)

A.Chindamporn：“白色念珠菌中重复序列 (RPS) 的染色体定位分析”微生物学。