人工真皮-表皮培養系を用いた実験的アミロイド生成に関する研究

利用人工真皮-表皮培养系统进行实验性淀粉样蛋白生产的研究

• 批准号: 07670945
• 负责人: 堀口 裕治
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670945/
• 关键词: 皮膚アミロイド症; アミロイド物質; 人口真皮; 表皮培養

1剥離表皮の培養の設定人工真皮上での成人ヒト剥離表皮器官培養を出来るだけ長期にわたって確立するために次の方法によって培養を試みた。剥離表皮は外科的切除皮膚の一部をデスパーゼで処理することによって得た。1)人工真皮上に剥離表皮を重層し、全体を培養液中に浸した。2)人工真皮上に剥離表皮を重層し、人工真皮のみを培養液中に浸した。3)人工真皮上に剥離表皮を重層し、全体をメッシュに乗せてそれを培養液表面に接触させた。4日間の培養の後、凍結切片を作成して組織学的、免疫組織学的に検討した結果、1)では全例で表皮細胞は全層で核は好酸化し、細胞は局融解をおこして死滅していた。基低層のα6インテグリンは消失していた。2)では4例中2例で上記の変化が見られ、2例では基低層に所々でα6インテグリンの発現が見られ、基低細胞の部分的な生着がうかがわれた。3)では行った3例の全例で基低層でのα6インテグリンの発現が確認されたが部分的に消失していた。2皮膚アミロイド症患者表皮の培養とアミロイド物質の検出苔癬型皮膚アミロイド症患者4例の皮膚をデスパーゼ処理により表皮真皮を分離し表皮を上記3)の方法によって器官培養し4日目に免疫組織化学的に検討した。多くの部分でα6インテグリンは発現していたが4型コラーゲンの発現は少なかった。明らかなアミロイドpコンポーネント陽性の物質は確認できなかったが、電顕的に観察した結果、径約8ナノメートルの直線状の線維が少数基低細胞の下部に確認され、アミロイド物質の産生がある可能性が示唆された。3考案皮膚アミロイド症の患者の多くは中高年であり、病変部よりの表皮の長期間の器官培養は容易でない。今後は、ある程度大きい皮膚からの単離有棘細胞の培養を試みる必要があると思われた。

1. Establishment of culture methods for exfoliated epidermis on artificial dermis A part of the skin removed by exfoliation surgery is treated with the following procedures: 1) The artificial dermis is peeled off from the epidermis and immersed in the whole culture medium. 2) The artificial dermis is separated from the epidermis and immersed in the culture medium. 3) The artificial dermis is separated from the epidermis layer, and the whole epidermis layer is separated from the culture medium surface. 4. Histological and immunohistological examination of cultured and frozen sections during the day. 1) The whole epidermis cells were acidified and the cells were melted. The α6-ray emission of the base layer disappears. 2) In 4 cases, 2 cases were found to be abnormal, 2 cases were found to be abnormal in the lower basal layer, and 2 cases were found to be abnormal in the lower basal layer. 3) All three cases were confirmed to have disappeared in the lower layer. 2. Culture of epidermis from patients with dermatosis and identification of lichen type skin from patients with dermatosis. 4. Methods of tissue culture and immunohistochemical study of epidermis from patients with dermatosis. The majority of the alpha-6 cells appear in type 4 cells. The results of the observation of the electric field and the linear dimension of the minority low cell with a diameter of about 8 were confirmed, and the possibility of the production of the positive substance was indicated. 3. It is easy to culture the organs of the epidermis for a long time in patients with skin diseases. In the future, it is necessary to cultivate the skin of the patient.

项目成果

Horiguchi Y. et al.: "Non-collageneous components in the dermoepidsermal junction" Electron Microscopy in Dermatology.131-137 (1994)

Horiguchi Y. 等人：“真皮表皮连接处的非胶原成分”皮肤病学电子显微镜.131-137 (1994)

Horiguchi Y. et al.: "Three dimensional cultures of Reratinocytes and an application to in vitro-amyloid production of cutaneous amyloidosis" J Microsc Res Tech. (in press).

Horiguchi Y. 等人：“再生细胞的三维培养物及其在皮肤淀粉样变性的体外淀粉样蛋白生产中的应用”J Microsc Res Tech。

Horiguchi Y, et al.: "Ultrastructural and immunohistochemical characterization of basal cells in three-dimensional culture models" Arch Dermatol Res. 286. 53-61 (1994)

Horiguchi Y 等人：“三维培养模型中基底细胞的超微结构和免疫组织化学特征”Arch Dermatol Res。

Horiguchi Y. et al.: "ultrastructural localization of E-cadherln cell adhesion molecule on the cytoplasmic menbrane of Reratinocytes in vivo and in vitro" J Histochem Cytochem. 42. 1333-1340 (1994)

Horiguchi Y. 等人：“E-cadherln 细胞粘附分子在体内和体外 Reratatin 细胞胞浆膜上的超微结构定位”J Histochem Cytochem。