腎マクラデンサの血管側Na-K-Cl輸送体及び管腔側Clチャネルのクローニング
腎マクラデンサの血管側Na-K-Cl輸送体及び管腔側Clチャネルのクローニング
肾黄斑血管Na-K-Cl转运蛋白和管腔Cl通道的克隆
批准号：
07671266
负责人：
長谷川 元
金额：
$1.54万
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1995 至 --
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英文摘要
(1)既に明らかにされているNa-K-2Cl(NKCC)cotransporter family及びthiazide sensitive NaCl cotransporter(TSC)の塩基配列より保存性が高くかつ膜貫通部位と思われる5箇所を選びPCR primerを4通り作製した。(2)ラット腎皮質及び腎髄質より得たmRNAよりcDNAプールを作製した。(3)これと先に作製したPCR primerとでNKCC類似の塩基配列を持つDNA fragmentを増幅した。(4)得られた断片をサブクローニングし、約120のDNA断片について制限酵素切断パターンを検討した。(5)既知のNKCC familyと異なるパターンを示したものをprobeとして腎髄質cDNAを検討し、ほぼ腎皮質特異的と思われる断片を特定した。(6)現在上記の断片のsequencingおよびmacula densaでの局在を確認するため、PCR-in situ hybridizationを行い、検討中である。
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